详细介绍
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
产品仅用于科研储存条件:
14℃或-20℃
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系油菜HCN10 LAMP试剂盒 |
英文名称 | Lamp kit for transgenic rape hcn10 |
货号 | YSP96481 |
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
组蛋白H3-K14乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K18乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K23乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K27乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K36乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K56乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K64乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K79乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H4乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H4-K5乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H4-K8乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H4-K12乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H4-K16乙酰化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H2B-K46甲基化(di)检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K4(mono/di/tri)甲基化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
组蛋白H3-K9(mono/di/tri)甲基化检测试剂盒100mL外观包装:黄棕粉状
1KG/铝箔袋可拆
转基因品系油菜HCN10 LAMP试剂盒17号染色体开放阅读框64抗体 英文缩写:C1orf227
17号染色体开放阅读框66抗体 英文缩写:C1orf228
17号染色体开放阅读框74抗体 英文缩写:C1orf229
17号染色体开放阅读框75抗体 英文缩写:C1orf25
17号染色体开放阅读框77抗体 英文缩写:C1orf31
17号染色体开放阅读框78抗体 英文缩写:C1orf33
维甲酸调节核基质相关蛋白抗体 英文缩写:C1orf38
17号染色体开放阅读框42抗体 英文缩写:C1orf41
17号染色体开放阅读框97抗体 英文缩写:C1orf43
猫眼综合征染色体候选基因1抗体 英文缩写:C1orf49