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AMP激活蛋白激酶α2(PRKAa2)重组蛋白

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更新时间:2023-03-31 11:33:55浏览次数:213

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 说明书
应用领域 化工 主要用途 科研实验
英文名称 Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Alp 物种 Homo sapiens (Human,人)
来源 原核表达 应用 Cell culture; Activity Assa
AMP激活蛋白激酶α2(PRKAa2)重组蛋白公司正在销售的产品:蛋白O-甘露糖基转移酶1(POMT1)重组蛋白 物种; Homo sapiens (Human,人) 来源; 原核表达 性状:冻干粉 谷光甘肽合成酶(GSS)重组蛋白 物种; Mus musculus (Mouse,小鼠) 来源; 原核表达 性状:冻干粉 岩藻糖基转移酶8(FUT8)重组蛋白 物种; Mus musculus (Mo

详细介绍

样品要求:

1、待标记样品需保证90%以上的纯度,样品中不含有干扰标记物结合的成分,如有特殊成分,请提前标注说明。

2、待标记样品最小标记量为1mg,最好是干粉,如果是液体,浓度应大于1mg/ml

3、抗体IgG样品中应不含BSA、叠氮钠成分。

4、大分子蛋白应提供分子量、等电点、缓冲液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物还需提供分子结构式。

5、请提前说明任何特殊情况。
公司产品仅供科研使用,不得用于临床!

产品名称:AMP激活蛋白激酶α2(PRKAa2)重组蛋白

 英文名称:Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Alpha 2 (PRKAa2)

AMPK; AMPK2; PRKAA; 5'-AMP-Activated Protein Kinase Catalytic Subunit Alpha-2; Acetyl-CoA carboxylase kinase; Hydroxymethylglutaryl-CoA reductase kinase

酶与激酶

物种:Homo   sapiens (Human,人)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::细胞核, 细胞质

预测分子量:31.4kDa

实际分子量:37kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Asp252~Ala493   with N-terminal His Tag

缓冲液成份:PBS,   pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性状:冻干粉

纯度:>   97%

等电点:6.8

应用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

 

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小泛素相关修饰蛋白3(SUMO3)重组蛋白 物种; S. cerevisiae (Yeast,酵母) 来源; 原核表达 性状:冻干粉

特性

重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式,原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态,真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存,这样使得重组蛋白非常稳定,-80条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,其中溶解的方法非常关键,因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意,这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。

(1)原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech大肠杆菌表达的冻干重组蛋白,已经从包涵体中提纯,添加了蛋白保护剂,使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可,复溶冻干蛋白100 μg,86 μl的超纯水,轻轻摇晃使蛋白溶解,再用移液枪的枪头轻吹几下即可溶解,一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。

(2)真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译,还要进行翻译后的加工,使得蛋白质的空间折叠方式维持正常,所以重组蛋白必须在真核细胞中进行,如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子,对翻译后的蛋白质进行加工,这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存,保持了其良好的活性和稳定性。

(3)类固醇还原酶1(SRD5α1)重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。我们通常加8%(质量比体积)的海藻糖作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集,也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。

操作步骤:

实体组织蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2  100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000/分,4离心5 min

4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分装保存于-70,避免反复冻融。

培养细胞蛋白提取

1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS1000/分离心5 min洗两次;

3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107

0.5 mL1 mL

5×106

0.2 mL0.5 mL

5.置于4摇床平台上,温和振荡15 min

6 14,000rpm4离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分装保存于-70,避免反复冻融

细刺奥斯特线虫PCR检测试剂盒 规格 50T 英文; Ostertagia leptospicularisPCR

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人冠状病毒PCR检测试剂盒 英文名称; Human Coronavirus(HCoV)OC4 RTPCR

人类嗜淋巴细胞病毒型PCR检测试剂盒 英文名称; Human Tcell Lymphoma Virus 1(HTLV1)T1RTPCR

人免疫缺陷病毒型群型PCR检测试剂盒 英文名称; Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1MA)1MARTPCR

蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。


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