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犬腺病毒PCR检测试剂盒

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更新时间:2023-03-14 16:51:21浏览次数:259

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产品简介

供货周期 现货 规格 50T
应用领域 化工 主要用途 用于科研
英文名称 Canine Adenovirus (CAV)PCR 储存条件 -20℃避光保存,避免反复冻融
分类 PCR检测试剂盒    
犬腺病毒PCR检测试剂盒公司正在出售的产品:牡蛎疱疹病毒(OsHV)核酸检测试剂盒
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详细介绍

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特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

产品名称

英文名称

规格

犬腺病毒PCR检测试剂盒

Canine Adenovirus (CAV)PCR

50T

详1.png

定量PCR方法:

荧光定量PCR探针法

荧光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探针法即除了引物外另外设置一个探针,在探针的两端分别带上发光集团和淬灭集团,这个时候,两个平衡不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被折断,释放出发光集团和淬灭集团,两个距离较远,发光集团产生荧光,被机器收集到信号,从而检测基因的量

染料能够与双链结合,当PCR扩增的时候,染料结合到DNA上,从而发光,单个的染料不发光,这样就能收集到信号,我们可以看出,染料法特异性不强,只要是双链的DNA都回结合发光。

在快速PCR中,通过缩减PCR步骤所需时间来完成更快的扩增,且不会影响扩增产量和效率。快速循环条件尤其适用于具有高扩增能力的DNA聚合酶,这类聚合酶在每个结合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸时间仅占低合成能力Taq聚合酶所需时间的1/21/3,却能维持较高的扩增效率。此外,如果引物的退火和延伸温度相差无几,则可将它们合并为一步,以进一步缩短PCR时间。这一过程也被称为 两步PCR法。

多重PCR的主要用于多种病原微生物的同时检测或鉴定和病原微生物,某些遗传病及癌基因的分型鉴定。多种病原微生物的同时检测或鉴定,是在同一PCR反应管中同时加上多种病原微生物的特异性引物,进行PCR扩增.可用于同时检测多种病原体或鉴定出是那一型病原体感染。

 

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530孵育23分钟。412000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530孵育10分钟后,于412000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,47000rpm离心5分钟。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其溶解,获得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度使用方法
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1.
标记 6 个离心管,分别为 765432
2.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3.
7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7.
用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8.
如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。

IgG/Cy5 Cy5标记的驴抗羊IgG 0.1ml

FADD Fas死亡结构域相关蛋白 0.1ml

抗子宫内膜抗体 anti-EMAb 0.2ml

Anti-Pdk4/FITC 荧光素标记酸脱氢酶4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr231) 0酸化微管相关蛋白抗体 规格 0.1ml

IgG/FITC 荧光素标记驴抗羊IgGMulti-class antibodies规格: 0.3ml
小鼠(PK)ELISA试剂盒 ,英文名: PK ELISA Kit

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Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1070) 0酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

猪血清 100ml 国产

ZNF786 英文名称: 锌指蛋白786抗体 0.2ml

DDAH2 英文名称: 双甲基精酸水解酶2抗体 0.2ml

抗丁酰脂酶单克隆抗体 Anti-BCHE 0.1ml
储存条件:
仅用于科研14或-20样品收集、处理及保存方法
1.
血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3.
细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4.
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5.
保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20
,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


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