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唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重组蛋白

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更新时间:2023-04-10 15:58:08浏览次数:218

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 说明书
应用领域 化工 主要用途 用于科研
英文名称 Recombinant Sialic Acid Acetylesterase (SIAE) 物种 Homo sapiens (Human,人)
来源 原核表达 应用 Cell culture; Activity Assa
唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重组蛋白的相关产品:CD24重组小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 标签) Protein
凋亡相关因子配体(FASL)重组蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
NAPG重组人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 标签) Protein
AK4 Protein

详细介绍

标签选择:

亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。

不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:

真核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体和宿主细胞(常用的CHOHEK293

b.      表达载体的构建

c.      无内毒素的质粒抽提

d.      细胞瞬时转染

e.      表达小试,条件优化

f.       表达分析和鉴定(SDS-PGAEWB

g.      大量表达

h.      亲和纯化

i.        检测和鉴定

仅供科研实验产品属性:

产品名称

物种

性状

来源

唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重组蛋白

Homo sapiens (Human,人)

冻干粉

原核表达

英文名称:Recombinant Sialic Acid Acetylesterase (SIAE)

YSG2; CSE-C; LSE; Sialic Acid-Specific Acetylesterase II; Sialic acid-specific 9-O-acetylesterase

酶与激酶

物种:Homo sapiens (Human,人)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::n/a

预测分子量:51.6kDa

实际分子量:54kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Ala22~Pro244 (Accession # Q9HAT2) with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性状:冻干粉

纯度:> 95%

等电点:-

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相关产品:

凋亡相关因子配体(FASL)重组蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)

AK4 Protein Human 重组人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 标签)

CD24重组小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 标签) Protein

IGFBP3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 标签)

NAPG重组人 NAPG

1.png

原核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体

b.      密码子优化

c.      基因合成/亚克隆

d.      转化表达菌株

e.      蛋白表达小试分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化

g.      如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。

h.      鉴定,包括SDS-PAGEWB鉴定

GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测

  诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。

操作步骤 :

根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品: 切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGEWestern blotting 和免疫沉淀等操作。

木霉属通用PCR检测试剂盒 英文名称; Trichoderma spp.PCR 50T

莫佩亚病毒PCR检测试剂盒 英文名称; Mopeia Virus(MOPV)RTPCR 50T

绵羊星状病毒型PCR检测试剂盒 英文名称; Ovine Astrovirus 1OAstV1RTPCR 50T

绵羊疱疹病毒通用PCR检测试剂盒 英文名称; Ovine HerpesvirusOHV)PCR 50T

N-cadherin N-钙粘附分子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-Apelin receptor Apelin receptor抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Bad(Ser112) 0酸化相关死亡促进因子抗体 规格 0.1ml

山羊抗兔 IgG(H+L)/FITC 0.1ml 绿色荧光,Jackson公司分装

Von Willebrand Factor 英文名称: 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体 0.1ml

Dppa4 英文名称: 多能发育相关基因4抗体 0.1ml

Anti-Apelin receptor Apelin receptor抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重组蛋白亮热厉螨PCR检测试剂盒 英文名称; Tropiladaps clareaePCR

两岐双岐杆菌PCR检测试剂盒 英文名称; Bifidobacterium bifidumPCR

链状带绦虫PCR检测试剂盒 英文名称; Taenia soliumPCR

链球菌组PCR检测试剂盒无乳? 英文名称; Group B Streptococcus spp.(GBS) BPCR

注意事项:  

1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。

3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。

4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


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