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脂肪酸去饱和酶1(FADS1)卵白蛋白偶联物

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更新时间:2023-04-12 14:52:43浏览次数:279

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 说明书
应用领域 化工 主要用途 用于科研
英文名称 OVA Conjugated Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1 物种 Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源 蛋白偶联 应用 Cell culture; Activity Assa
脂肪酸去饱和酶1(FADS1)卵白蛋白偶联物的相关产品:PFDN2重组人 PFD2 / PFDN2 蛋白 (His 标签) Protein
SSTR3 peptide 受体3抗原 0.5mgSSTR3 peptide 受体3抗原
PRMT3重组人 PRMT3 蛋白 (GST 标签) Protein
ATOX1 Protein Human 重组人 ATOX1 / HAH1 蛋白 (H

详细介绍

仅供科研实验产品属性:

产品名称

物种

性状

来源

脂肪酸去饱和酶1(FADS1)卵白蛋白偶联物

Mus musculus (Mouse,小鼠)

冻干粉

原核表达

英文名称:OVA Conjugated Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)

D5D; FADS6; FADSD5; LLCDL1; TU12; Delta-5 Desaturase; Delta(5) fatty acid desaturase

酶与激酶 代谢通路

物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)

来源:蛋白偶联

原分子量-

缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4

性状:冻干粉

纯度:> 90%

等电点:-

应用:Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

标签选择:

亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。

不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:

真核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体和宿主细胞(常用的CHOHEK293

b.      表达载体的构建

c.      无内毒素的质粒抽提

d.      细胞瞬时转染

e.      表达小试,条件优化

f.       表达分析和鉴定(SDS-PGAEWB

g.      大量表达

h.      亲和纯化

i.        检测和鉴定

原核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体

b.      密码子优化

c.      基因合成/亚克隆

d.      转化表达菌株

e.      蛋白表达小试分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化

g.      如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。

h.      鉴定,包括SDS-PAGEWB鉴定

GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测

  诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。

1.png

注意事项:  

1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。

3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。

4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

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SERPIND1 Protein Human 重组人 SerpinD1 蛋白 (His 标签)

PRMT3重组人 PRMT3 蛋白 (GST 标签) Protein

操作步骤 :

根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品: 切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGEWestern blotting 和免疫沉淀等操作。

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