产品名称：EZ®小鼠组织DNA直扩PCR试剂盒
英文名称：EZ Mouse DNA Direct PCR Kit
产品规格：50T/200T
产品价格：420/1350元
试剂盒应用：转基因小鼠、基因缺失小鼠鉴定。
试剂盒组成：MuDNA-EZ-1、MuDNA-EZ-2、MuDNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O
保存条件：-20ºC保存。使用前将MuDNA-EZ-1、MuDNA-EZ-3在室温或37ºC充分溶解。MuDNA-EZ-2、2×TaqMix使用时需置于冰上。
使用方法：
（1）将MuDNA-EZ-1和MuDNA-EZ-2以25：1的比例混合均匀，并分装每管26µL。
（2）剪取小鼠尾巴1-3毫米，*浸入上述溶液中。
（3）置于50ºC加热30分钟。
（4）置于95ºC加热10分钟。
（5）加入50µL MuDNA-EZ-3。
（4）取上述处理液进行PCR扩增。
推荐的PCR加样体系
成分 | 总20 μL体系 |
2×TaqMix | 10 μL |
上游引物（10 μM） | 1 μL |
下游引物（10 μM） | 1 μL |
模板DNA | 2 μL |
H2O | 6 μL |
PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 oC | 5 min |
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变性 | 94 oC | 30 s |
30-35 |
退火 | 50~72 oC | 30 s | |
延伸 | 72 oC | 1 kb/min | |
终延伸 | 72 oC | 10 min |
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| 4 oC | Hold |
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EZ®小鼠组织DNA直扩PCR试剂盒注意事项
（1）剪取不同小鼠尾巴时，应当更换剪刀，用过的剪刀经过84消毒液浸泡和净水清洗后再使用。
（2）应当设置野生型小鼠的对照。
（3）PCR的退火温度可根据引物的预测Tm值减去5ºC，或者通过梯度PCR摸索较佳退火温度。
（4）TaqMix中加入了染料和相应试剂，PCR后可直接进行电泳，无需另加Loading buffer。
A129小鼠（JAX number：010830）的鉴定。取2mm鼠尾，用EZ011试剂盒进行直接扩增，A129小鼠出现250bp条带，而野生小鼠呈现155bp条带，说明该小鼠为纯合的突变子。
SYISL缺失小鼠（PNAS，2018）的鉴定。取2mm鼠尾，用EZ011试剂盒进行直接扩增，野生小鼠出现1500bp条带，SYISL缺失小鼠出现455bp条带，说明该小鼠为纯合的突变子。
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