产品简介
供货周期 | 现货 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
---|---|---|---|
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) |
种属 | Homo sapiens (Human,人) | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生实业有限公司 |
—— 销售热线 ——
15201736385 |
参考价 | 面议 |
更新时间:2023-03-21 21:54:20浏览次数:221
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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
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主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) |
种属 | Homo sapiens (Human,人) | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介绍:
SMPD2; N-SMase; ISC1; Neutral Sphingomyelin Phosphodiesterase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 2,Neutral Membrane; Lyso-platelet-activating factor-phospholipase C 酶与激酶 物种:Homo sapiens (Human,人) 来源:原核表达 宿主E.coli 内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定) 亚细胞定位::细胞膜 预测分子量:57.2kDa 实际分子量:57kDa(差异分析请参阅说明书) 片段与标签:Lys2~Arg236 with N-terminal His and GST Tag 缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性状:冻干粉 纯度:> 97% 等电点:6.8 应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 规格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司产品仅供科研使用,不得用于临床!
产品名称 | 英文名称 | 物种 |
中性鞘磷脂酶(NSMASE)重组蛋白 | Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
ARC产品名称: 即刻早期基因ARC抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
CPLX1产品名称: Complexin I/复合su1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow
EIF2B3产品名称: eIF2Bγ单克隆抗体交叉反应: Human
BXDC2产品名称: BXDC2蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
AF10产品名称: 髓系、淋巴、混合系白易位基因10抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
human CD22/FITC产品名称: FITC标记小鼠抗人CD22单克隆抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
HES1产品名称: 转录因子HES-1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
NFKB p65产品名称: 细胞核因子/k基因结合核因子单克隆抗体产品别名: NFκB-p65; NFκB p65; NF κB-p65; NFκBp65;
ZNF25产品名称: 锌指蛋白25抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
SREBP1产品名称: 调节元件结合蛋白1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Sheep
中性鞘磷脂酶(NSMASE)重组蛋白人白介su1受体拮抗剂(IL-1RA)ELISA试剂盒IL-1RA白介su1受体拮抗剂elisamei联免疫试剂盒Human Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA kit
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注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作