氨基比林N去甲基化酶（AND）可见分光光度

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
产品名称：氨基比林N去甲基化酶（AND）可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/24样
测试方法: 可见分光光度法
货号：GOY-01S6779
分类：P454系列
商品介绍：
细胞色素P450酶是一组在外源物质代谢中，尤其是药物和毒物，具有重要作用的酶系。AND作为P450酶系的重要一员，相当于CYP3A4亚型，与药物的去甲基化反应密切相关。

测定原理：

AND催化氨基比林释放甲醛，通过Nash比色法测定甲醛含量，即可计算出AND活性。

自备仪器和用品：

普通离心机，超速离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水、无水乙醇和冰。
试剂的组成和配制
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体18μL×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1瓶， 4℃保存；
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表：

样本的前处理
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL  酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次

Cy3-dCTP 溶液，10mM25μL  酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次

Cy5-dCTP 溶液，10mM25μL  酵母电转感受态细胞制备试剂盒20 次

柱式探针纯化试剂盒10 次  酵母蛋白酶抑制剂1mL

Sephadex G50 介质10mL  酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL

间充质干细胞软骨细胞分化生长因子5mL  EGY48 酵母感受态细胞10×100μL

间充质干细胞生长因子5mL  EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白级10mL

间充质干细胞生长因子 - 无血淸5mL  EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL

间充质干细胞脂防细胞分化生长因子5mL  EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol

角膜上皮细胞生长因子5mL  ECL 法杂交检测试剂盒5次
大鼠1,25二羟基D3(1,25 DHVD3)elisa分析检测试剂盒

大鼠1,25二羟基D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒

大鼠1,25二羟基D3(1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3)elisa检测试剂盒

大鼠1,25-二羟基D3(DHVD3)elisa检测试剂盒

大鼠1,25-二羟D(3)24-羟化酶,线粒体(CYP24A1)elisa分析检测试剂盒
氨基比林N去甲基化酶（AND）可见分光光度法测试盒暗盒 (5×7 英寸 )1个  素溶液 ,100mg/mL10mL

暗盒 (8×10 英寸 )1个  黑色素细胞生长因子5mL

DNA 包被溶液100mL  黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL

X 光片 (5×7 英寸 )1盒  核酸印迹膜染液100mL

X 光片 (8×10 英寸 )1盒  核酸稀释液，测 OD 专用100mL
FBP活性计算：
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。