非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 COS1说明书

非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书
形态特性  成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  此细胞株源自CV-1细胞株，经带有编码野生型T抗原的起始失活突变的SV40转染得到。 这些细胞含有一个来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类

非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

人脐带单核细胞*培养基100mL
rCSC, 大鼠心肌细胞 Rattus
强壮纤维单胞菌 Cellulomonas cartae
NCI-H2087(人非小细胞肺腺细胞)5×106cells/瓶×2
米曲霉 Aspergillus oryzae
黑曲霉 Aspergillus niger
大鼠胰岛素细胞英文名称：INS-1
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MKN45(人胃细胞)5×106cells/瓶×2
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
不吸水链霉菌 Streptomyces ahygroscopicus
大鼠肝细胞瘤细胞英文名称：H-4-II-E
青春双歧杆菌 Bifidobacterium adolensentis
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
PK-15(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2
杆菌属 Lactobacillus sp.
菜豆根瘤菌 Mesorhizobium phaseoli
TM3(小鼠睾间质细胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
土曲霉5g    甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)    
1000U    核酸内切酶 IV    
5g    D- 甘露糖    
10mL    去垢剂去除树脂    
碱性品红    CAS58969-01-0    5g
超培养基    60404-100    100mL
5次    一站式大提柱式 miRNAout    
5mL    间充质干细胞生长因子 - 无血淸    
25g    L- 酪氨酸    
100 次    dNTP 和引物清除剂    
甲基纤维素    CAS9004-67-5    25g
谷胱甘肽琼脂糖    120101-2    2mL
100 次    真细种属鉴定 PCR Mix 2    
20只/袋    口腔拭子 ( 医用简装 )     
25g    硝酸银    
10×100μL    AGL1 农杆感受态细胞    
非洲绿猴肾细胞（SV40转化）；COS-1 [COS1]说明书核黄素    CAS83-88-5    25g
十二烷基磺酸清除剂    131051-25    25mL
50 次    柱式土壤 DNAout    
粪便 DNAout    70601-30    30 次
1mg    Rhod-2，三盐    
100mL    DEPC 水