详细介绍
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 FRhK-4细胞株来自300克重恒河猴正常雌性胚胎的肾组织。该细胞系是上皮细胞样的连续细胞株,且已被数家实验室用作甲型肝炎研究。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C57
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
斯氏假单胞菌 Pseudomonas stutzeri
大鼠颌下腺上皮细胞*培养基100mL
荨麻青霉 Penicillium urticae
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RSC96(大鼠雪旺细胞)5×106cells/瓶×2
杆菌属 Lactobacillus sp.
根瘤菌
U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2
日沟维肠杆菌 Enterobacter gergoviae
白垩色镰孢
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
HCT-8(人盲肠腺细胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中华根瘤菌
SDS-PAGE浓胶缓冲液(4x)200ml国产
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mL
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
百脉根根瘤菌 Rhizobium loti
OVCAR-3(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2gersion
植物杆菌 Lactobacillus plantarum核糖核酸酶 B CAS9001-99-4 100mg
D-Hanks 溶液 100927-100 100mL
细 RNAout 51102-250 250 次
10g Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯
5μg 6nt 随机引物,0.5μg/μL
100mg Calcein M
100mL DNA Sarkosyl 溶液,10%
Cyanine 3-NHS Ester 22-0140-12 12x50nm
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装 ) 17-019-1000 1000 支
5mL 平滑肌细胞生长因子 ( 不含血清 )
10 次 百万碱基细 (G+)DNAout
1g SNP(NO 供体 )
25000U T7 RNA 聚合酶
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 ) 23-0720-2 2g
线状 DNA 清除剂 101101-30 30 次
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5
25mL 超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒(ECL)
100mL 红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 )
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]价格10mL 链脲佐素溶液 ,10mg/mL
GSH 试剂盒 ( 谷胱甘肽测试盒 )( 比色法 ) 18-0090-50 50 T
DNA Tris HCl,1M,pH8.0 101206-100 100mL
100mL SSPE 溶液 ,20×
50 次 DNA 电泳分子量标准 (100-200 bp)
1mL 绿如蓝染料,PCR