详细介绍
小香猪皮肤细胞;SSC-S2价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小香猪皮肤细胞;SSC-S2价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性五指山小香猪的皮肤组织。2002年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
2V6.11(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2
狗肾恶性组织细胞增生症细胞 英文名称: DH82
STO(小鼠胚成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2
T1N3肉汤/T1N3 Broth 霍乱弧菌的生长试验 国产/进口 250克
小鼠睾间质细胞瘤细胞 英文名称: MLTC-1
葛根素 规格: 20mg/支;98%
人胰岛β细胞*培养基 100mL
Fraser培养基/Fraser Medium 李氏菌的增菌培养 国产/进口 250克
人肤肥大细胞*培养基 100mL
WS琼脂/Wuhan Salmonella Agar 分离沙门氏菌和志贺氏菌用 国产/进口 250克
人肺细胞 英文名称: Calu-1
碱性蛋白胨水/3%氯化钠碱性蛋白胨水/Alkaline Peptone Water 副溶血性弧菌的选择性增菌培养 国产/进口 250克
大鼠胰腺上细胞*培养基 100mL
葡萄糖半固体培养基/葡萄糖半固体发酵管/Dextrose Semisolid Medium 用于志贺氏菌的生化试验 国产/进口 250克
大鼠表角质形成细胞*培养基 100mL
血清消化粉/Serum powder BR 国产/进口 250克 100g 电泳尿素
少突胶质前体细胞生长因子 21-0330-5 5mL
RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四二 ) 101223-100 100g
250 mL PLPD 固定液
500U BglII
200mg L-NAME(eNOS 抑制剂 )
50 次 端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP)
LPS(TLR4 激活剂 ) 23-0450-0.5 0.5mg
一管式植物 DNAout 60705-50 50 次
25mg RNA Oligo(dT) 纤维素
25μL Cy5-dCTP 溶液,10mM
50 次 加 A 试剂盒
1个 15mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)
Hoechst33258 干粉 130864-10 10mg
壳聚糖磁珠 130520-2 2mL
50mg S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制剂 )
5mg Di-2-ANEPEQ
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0
1mL X33 酵母种
cDNA 文库构建试剂盒 130826-5 5次
微量 DNA 助沉剂 3621-0.1 0.1mL
20 次 双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 647·7-AAD)
5g DTT,蛋白