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家兔皮肤来源细胞说明书

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具体成交价以合同协议为准
  • 型号
  • 品牌 ATCC
  • 厂商性质 经销商
  • 所在地 上海市

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更新时间:2017-01-23 14:13:01浏览次数:421

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

家兔皮肤来源细胞说明书售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

详细介绍

家兔皮肤来源细胞说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称 家兔皮肤来源细胞说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一只出生三天的雌性家兔的耳皮肤组织。由中科院昆明细胞库于2014年建立。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 无
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

 岩白菜素    分子式:    328.27144    分子量:    C14H16O9    英文名称:    Bergeninum    CAS号:    477-90-7    
 槐角苷    分子式:    432.38    分子量:    C21H20O10    英文名称:    Sophoricoside    CAS号:    152-95-4    
 穗花牡荆甙    分子式:    466.44    分子量:    C22 H26 O11    英文名称:    Honoka Vitexin    CAS号:    11027-63-7    
 芒柄花苷    分子式:    430.4    分子量:    C22H22O9    英文名称:    Flower stalk    CAS号:    486-62-4    
 环孢菌素C    分子式:    1218.61064    分子量:    C62H111N11O1    英文名称:    Cyclosporine C.    CAS号:    59787-61-0    
 东莨菪素    分子式:    192.168    分子量:    C10H8O4    英文名称:    Scopoletin    CAS号:    92-61-5    
 川芎嗪    分子式:    136.19    分子量:    C8H12N2    英文名称:    Ligustrazine    CAS号:    1124-11-4    
 直接耐晒黄5GL    分子式:    662.62    分子量:     C25H20N4Na2O9S3    英文名称:    Direct fast yellow 5GL    CAS号:    10190-68-8    
 全染色剂    分子式:        分子量:        英文名称:    Total coloring agent    CAS号:    863827    
 弱酸性红A    分子式:        分子量:        英文名称:    Weak acid red A    CAS号:  双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 555·7-AAD)    140629-50    50 次
Southern Marker DL2000(DIG)    120654D-20    20 次
30 次    石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒    
100 次    动物细胞核蛋白微量制备试剂盒    
1g    溶酶    
250mg    胃蛋白酶    
氯化镁六水    CAS7791-18-6    100g
木瓜蛋白酶抑制剂溶液,0.5 mg/mL    130533-10    10mL
50 次    柱式尿液 DNAout    
500 次    MTT 检测试剂盒    
0.25mL    ATP 溶液,100mM    
50 次    一管式病毒 DNAout    
1mL    BL21(AI)种    
大肠杆 DNA 连接酶    120419-1000    1000U
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)    130922-50    50 次
10 次    WGA 糖蛋白分离试剂盒    
100 次     H5N1 神经氨酸酶抑制剂鉴定试剂盒    
100g    胆固醇    
250 mL    多聚甲醛 - 磷酸缓冲固定液    
L- 酪氨酸    CAS60-18-4    25g
HT 筛选培养基    19-0100-500     500mL
大提柱式血液 DNAout    80924-4    4次
100mL    琼脂糖凝胶 4B          

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