详细介绍
兔主动脉平滑肌细胞;SMC价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
兔主动脉平滑肌细胞;SMC价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于兔主动脉,常用作动脉粥样硬化的研究。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 P10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体 40~44
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
穿心莲内酯 分子式: 350.4492 分子量: C20H30O5 英文名称: Andrographolide CAS号: 5508-58-7
酸性橙74 分子式: 441.35 分子量: C16H12N5NaO7S 英文名称: Acid orange 74 CAS号: 10127-27-2
酸性媒介橙R 分子式: 分子量: 英文名称: Acid medium orange R CAS号: VDDSV
酸性蓝BGA 分子式: 分子量: 英文名称: Acid blue BGA CAS号:
次甲基蓝 分子式: 373.9 分子量: C16H18ClN3S·3H2O 英文名称: Methylene blue CAS号: 7220-79-3
异丁酸纳 分子式: 分子量: 英文名称: ISO butyrate CAS号: 996-30-5
3-苯甲基-5-(2-羟基乙基)-4-甲基噻唑啉氯 分子式: 269.79 分子量: C13H16ClNOS 英文名称: 3- -5- (2- hydroxy ethyl benzene methyl) -4- methyl thiazole chloride CAS号: 4568-71-2
磷钼酸 分子式: 1861.43(无水计) 分子量: H7〔P(Mo2O7)6〕·XH2O 英文名称: Phosphomolybdic acid CAS号: 51429-74-4
苄橙 分子式: 801.78 分子量: C35H25N5Na2O9S3 英文名称: Benzyl orange CAS号: 2429-80-3
5KU β- 半乳糖苷酶
50 T 丙二醛测试盒 / 脂质过氧化物测试盒
胶原酶Ⅳ型 CAS9001-12-1 100mg
兔抗鸡 IgY,辣根过氧化物酶标记 131152-300 300μL
柱式软骨 RNAout 101121-50 50 次
1g n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
1个 4mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)
5mL 上皮细胞生长因子 -2
1.5mL DNA 尿素 -PAGE 上样液
少突胶质细胞生长因子 21-0340-5 5mL
RNA Guanidium HCl ( 盐酸胍 ) 101224-100 100g
1mg PMA/TPA (PKC 激活剂 )
1mL BJ5183 种
5mg L-NMMA( 总 NOS 抑制剂 )
500 次 MTT 检测试剂盒
LY294002(PI3K 抑制剂 ) 23-0460-1 1mg
一管式植物 DNAout 60705-500 500 次
100g RNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
12x50nm Cyanine 3-NHS Ester
50 次 加 T 试剂盒
1个 15mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)
Hoechst33342 干粉 130865-10 10mg