详细介绍
犬细支气管上皮细胞;CBE1价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
犬细支气管上皮细胞;CBE1价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
二苯胺磺酸钡 分子式: 633.88 分子量: C24H20BaN2O6S2 英文名称: Two aniline sulfonic acid CAS号: 6211-24-1
靛红 分子式: 147.13 分子量: C8H5NO2 英文名称: Isatin CAS号: 91-56-5
克利西丁 分子式: 137.18 分子量: C8H11NO;CH3OC6H3(CH3)NH 英文名称: Chris Shiden CAS号: 120-71-8
4-硝基-7-苯并氧杂恶二唑 分子式: 249.23 分子量: C10H11N5O3 英文名称: 4- nitro -7- piperazine benzo oxa evil two triazole CAS号: 139332-66-4
异丙硫醇 分子式: 76.16 分子量: C3H8S 英文名称: ISO - C CAS号: 75-33-2
叔丁基硫 分子式: 146.29 分子量: C8H18S 英文名称: Tert butyl sulfide CAS号: 107-47-1
丁二酸 分子式: 118.09 分子量: C4H6O4 英文名称: Succinate CAS号: 110-15-6
嘧啶肟草 分子式: 609.59 分子量: C32H27N5O8 英文名称: Ether of the CAS号: 168088-61-7
克菌丹 分子式: 330.6 分子量: C9H8NSO2Cl3 英文名称: Captan CAS号: 133-06-2
醋酸泼尼松 分子式: 400.46 分子量: C23H28O6 英文名称: Prednisone acetate CAS号: 125-10-0
低载量 PCR 片段纯化试剂盒 90211-100 100 次
100 次 双荧光素酶报告基因检测试剂盒
200mL 大鼠粒细胞分离液 1.119
0.1mL×10 DH5α 化学感受态细胞
1mL 抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL
EcoRI 17-0050 2000U
DAB 法生物素杂交试剂盒 131214-5 5次
100μg Tth RecA 蛋白
50 次 端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP)
5次 PCR 法 DNA 探针生物素标记试剂盒
10U ATP 硫酸化酶
细种属鉴定及分型 D026-1 1 个样
T3 体外转录试剂盒 91108A-50 50 次
1g 维生素 D3
100mL 福林酚试剂
5g 8- 羟基喹啉硫
100mL 酵母产孢培养基
加拿大树胶 CAS8007-47-4 100mL
去垢剂去除树脂 131050-10 10mL
10 次 柱式探针纯化试剂盒
5g 玫瑰红盐
1g 氨苄青干粉
1.5mL 非酶 RNA 清除剂 1.0
1mL Y2HGold 酵母种