详细介绍
犬胸腺细胞;cf2Th说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 犬胸腺细胞;cf2Th说明书
形态特性
生长特性 贴壁
特征特性 该细胞为几种逆转录病毒的敏感株,可用于扩增逆转录病毒。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
传代方法 1:2-1:6,每周换液2-3次
传代情况
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
1,4-丁内酯 分子式: 86.09 分子量: C4H6O2 英文名称: 1,4- butyl ester CAS号: 96-48-0
1,2-二乙氧基乙烷 分子式: 118.17 分子量: C6H14O2 英文名称: 1,2- two ethylene oxide CAS号: 629-14-1
二氯酞菁硅 分子式: 611.52 分子量: C32H16Cl2N8Si 英文名称: Two chloride CAS号: 19333-10-9
药根碱 分子式: 338.38 分子量: C20H20NO4 英文名称: Drug base CAS号: 3621-38-3
吡嘧磺隆 分子式: 414.39 分子量: C14H18N6O7S 英文名称: Pyrazosulfuron CAS号: 93697-74-6
氟替卡松 分子式: 500.57 分子量: C25H31F3O5S 英文名称: Fluticasone CAS号: 90566-53-3
密灭汀A4 分子式: 542.7 分子量: C32H46O7 英文名称: Mi A4 CAS号: 51596-11-3
梓醇 分子式: 362.33 分子量: C15H22O10 英文名称: Catalpol CAS号: 2415-24-9
盐酸依立替康 分子式: 623.15 分子量: C33H38N4O6.HCl 英文名称: Hydrochloric acid in accordance with CAS号: 100286-90-6
五味子丙素 分子式: 384.428 分子量: C22H24O6 英文名称: The C CAS号: 61301-33-5
人参皂甙Rc 分子式: 1079.2685 分子量: C53H90O22 英文名称: Ginsenoside Rc CAS号: 11021-14-0
D(+)-五水棉子糖 分子式: 594.51 分子量: C18H42O21 英文名称: D (+) - raffinose five water CAS号: 17629-30-0
黄芩素 分子式: 270.24 分子量: C15H10O5 英文名称: Huang Qinsu CAS号: 491-67-8 伊红 Y, 醇溶性 CAS15086-94-9 10g
磷酸化蛋白富集试剂盒 131066-10 10 次
1个 杂交管 (35×200mm)
2mL 链霉亲和素磁珠
100 支 1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装已灭带芯 )
20μL Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)
0.25mL GTP 溶液,100mM
总 SOD 活性检测试剂盒 (WST 法 ) 18-0710-100 100 次
DNA 探针变性液 131208-10 10mL
300U TEV 蛋白酶
10mL 非冻型血液 RNA 保存液
25mg 多聚 -L- 赖氨酸 (7-15 万 )
100 次 哺乳动物种属鉴定 PCR Mix
聚乙烯醇 CAS9002-89-5 100g
Western 印迹膜抗体清除剂 80813-50 50mL
RNase 抑制剂 ( 人源 ) 3290-400 400U
5g 牛血红蛋白
1mL AH109 酵母种
1mg Quin-2AM
100mL 沉淀型 TMB 显色试剂盒
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 ) 22-0580-25 25mg