仓鼠肾细胞；HL-1说明书

仓鼠肾细胞；HL-1说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 仓鼠肾细胞；HL-1说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C10
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

 龙血素B    分子式：    316.35    分子量：    C18H20O5    英文名称：    Loureirin B    CAS号：    119425-90-0    
 高乌甲素    分子式：    584.71    分子量：    C32H44N2O8    英文名称：    Gao Wu    CAS号：    32854-75-4    
 二氢石蒜碱    分子式：    289.32636    分子量：    C16H19NO4    英文名称：    Two Shi Suanjian    CAS号：    6271-21-2    
 扁蓄苷    分子式：    434.35032    分子量：    C20H18O11    英文名称：    Avicularin    CAS号：    22255-13-6    
 活性艳蓝KN-R    分子式：    626.54    分子量：     C22H16N2Na2O11S3    英文名称：    Reactive brilliant blue KN-R    CAS号：    2580-78-1    
 吖啶红    分子式：    274.75    分子量：     C15H15ClN2O    英文名称：    Ya Dinghong    CAS号：    2465-29-4    
 酸性ATT    分子式：        分子量：        英文名称：    Acid black ATT    CAS号：        
 Dichloro[8-(di-tert-butylphosphinooxy)quinoline]palladium(II)      分子式：        分子量：        英文名称：    Dichloro[8- (di-tert-butylphosphinooxy) quinoline]palladium (II)    CAS号：    1100332-45-3    
 盐酸溴己新    分子式：    412.59    分子量：     C14H21Br2ClN2    英文名称：    Hydrochloric acid bromide    CAS号：    611-75-6    
 钯碳触媒    分子式：        分子量：        英文名称：    Palladium carbon catalyst    CAS号：        
 二苯胺磺酸钠    分子式：    271.27    分子量：     C12H10NNaO3S    英文名称：    Two aniline sulfonic acid sodium    CAS号：    6152-67-6    
 天青I    分子式：    305.83    分子量：     C15H16ClN3S    英文名称：    Azure I    CAS号：    531-55-5  
1000U    Mlu    
200U    AMV 逆转录酶    
2500U    RNase 抑制剂 ( 人源 )    
5次    天净沙非同位素探针杂交试剂盒    
GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)    130653-200    200U
cDNA *链合成试剂盒    60906-50    50 次
1000 μL    VDAC1 小鼠单抗    
100mL    非冻型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 )     
25g    葡聚糖凝胶 G-15    
10mg    Hoechst33342 干粉    
L- 天门冬氨酸    CAS56-84-8    25g
lambda(λ)DNA    90407A-5    5μg
10 次    小 RNA 克隆试剂盒    
1套    硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )    
250g    聚乙二醇 6000    
25μL    Cy3-dCTP 溶液，10mM    
3-(3,4- 二羟基苯 )-L- 丙氨酸    CAS59-92-7    5g
SURE 种    12-255    1mL
50 次    一步法无内毒素质粒 DNAout    
1g    姬姆色素染料    
5g    固蓝 BB 盐    
100mg    辣根过氧化物酶，偶联    
吲哚 -3- 丁酸    CAS133-32-4    1g
RIPA 裂解液 ( 强 )    131006-100    100mL