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亮绿琼脂培养基实验原理

时间:2020-9-24阅读:66
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产品名称: 亮绿琼脂            
产品英文名称: Brilliant Green Agar            
培养基类型: 选择与鉴别培养基
产品规格: 250g、500g 添加剂需另购
产品外观: 米色至绿色均一粉末。
颜色与澄清度: 绿色至棕色凝胶。
保存条件: 密封,2-25°C保存。
注意事项: 避免摄入、呼入和皮肤接触。


用途:
BG琼脂用于从粪便类样品中分离和检测沙门氏菌。
BG琼脂用于检测食品中中的沙门氏菌。
BG琼脂选择性强,容许接种量大,即使样品中沙门氏菌含量极少,也可以检测到。


原理:
亮绿琼脂也是一种基于肠道菌对乳糖-蔗糖发酵能力进行鉴别的培养基。亮绿染料是抑制剂,抑制革兰氏阳性菌和大多数革兰氏阴性杆菌生长,对绝大多数沙门氏菌无抑制作用。酚红作为酸碱指示剂,酸性条件下显黄色,碱性条件下显红色。乳糖-蔗糖发酵产酸的细菌,菌落显黄绿色,四周培养基显黄绿色。沙门氏菌和其它非乳糖-蔗糖发酵型微生物菌落呈红色、粉色或白色,四周培养基呈亮红色。

煌绿琼脂是Kristensen等人早研制的,作为沙门氏菌分离培养基。Kauffmann对煌绿琼脂的配方进行了改良,煌绿琼脂(Kauffmann)配方的抑制性-强,适用于从粪便等重度污染的样品中分离和检测沙门氏菌。鉴于Kauffmann配方的高选择性,煌绿琼脂(Kauffmann)应该与初步选择性琼脂(如麦康凯琼脂)和富集增菌用肉汤(如四磺酸盐肉汤)联合使用,提高低含量样品的检出率。

产品描述:
亮绿琼脂(Brilliant Green Agar)也称亮绿酚红乳糖蔗糖琼脂,简称BG琼脂,是一种选择性培养基,用于分离沙门氏菌属(伤寒杆菌除外)。本培养基采用的是Kauffmann配方。

配制方法:
称取50g本品,加1000mL超纯水,煮沸1min至*溶解。
121°C高温蒸汽灭菌15min。
冷却至50度左右时,倒平板。


配方: g/L
酵母浸粉                  3.0g
胰酪蛋白胨      5.0g
动物组织胃蛋白酶消化物      5.0g
乳糖                 10.0g
蔗糖                 10.0g
氯化钠               5.0g
苯酚红                      0.08g
煌绿                        0.0125g
琼脂                20.0g
pH6.9±0.2(25℃)


实验方法:
亮绿琼脂应该与其它选择性培养基配合使用,如去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂(Hynes)、HE琼脂、X.L.D.琼脂。
待检样品预先用增菌性或选择性肉汤培养,然后在BG琼脂上接种,能增加沙门氏菌检出率。配合使用的培养基有四硫磺酸盐肉汤、亚-硒酸盐肉汤。
向亮绿琼脂中添加磺胺类药物(0.8g或1g)能够提高沙门氏菌检出率。
35°C条件下,培养18-24h。检查菌落特征。
非乳糖-蔗糖发酵型微生物 (主要是沙门氏菌)形成红色、粉色、白色,不透明菌落,周围培养基呈亮红色。
变形杆菌和假单胞菌形成红色小菌落。
乳糖-蔗糖发酵型微生物生长受阻碍,形成黄色、黄绿色菌落,四周培养基有显著的黄绿色。一般属于大肠埃希氏菌、克雷伯菌属(Klebsiella)、肠杆菌(Enterobacter)。

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