SmartCell神经酰胺高尔基体染色试剂盒Green

产品描述
　　高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体，参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网（ER）中内置的蛋白质和脂质，并准备将其输出到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。
Smart Cell NBD 神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便，快速的方法，可以选择性地对活细胞或醛固定细胞中的高尔基染色。将 C6 NBD 神经酰胺与牛血清白蛋白（C6-NBD-Ceramide-BSA）形成复合物给予细胞。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。
订购信息

产品组分

运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光保存，有效期12个月。
使用方法
简要概述
1.根据需要处理细胞。
2.加入 C6 NBD 神经酰胺工作溶液，在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
3.更换染色缓冲液，在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4.使用 FITC 滤镜套件在显微镜下观察。
5.可选：用 4％甲醛固定细胞。
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在 -20℃ 下，避免重复冻融循环。
C6 NBD 神经酰胺储备溶液（100X）：将 100 µL的DMSO（组分 C）加入小瓶 C6 NBD 神经酰胺（组分 A）中并充分混合。【注】：将未使用的 C6 NBD 神经酰胺原液在 -20℃ 保存，避免冻融循环。
2.工作溶液配制
C6 NBD 神经酰胺工作液：将 10 µL的NBD 神经酰胺原液（100X）添加到 990 µL的染色缓冲液（组分 B）中，制成 NBD 神经酰胺工作液。
可选：将 10 µL的Hoechst 33342（组分 D）添加到 1mL的NBD 神经酰胺工作溶液中以进行核染色。
操作步骤
1. 根据需要处理细胞。
2. 直接在细胞培养基中加入 100µL的C6 NBD 神经酰胺工作溶液。
3. 在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4. 除去 C6 NBD 神经酰胺工作溶液，并用 100 µL /孔的染色缓冲液（组分 B）代替。
5. 在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
6. 在装有 FITC 滤光片的荧光显微镜下观察。
7. 从步骤 4 中除去染色缓冲液，然后向每个孔中添加 100 µL /孔/ 96 孔板的 4％ 甲醛固定缓冲液（未提供）。【注】：对于非贴壁细胞，请添加所需量（例如 2X106细胞/ mL）的 4％甲醛固定液。（可选）
8. 在室温下将平板孵育 20-30 min，去除固定剂。用 PBS 洗涤细胞 2-3 次，然后用 100 µL /孔的染色缓冲液（组分 B）替换。（可选）
注意事项

1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

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