非洲马瘟病毒RT-PCR试剂盒 返回列表页

非洲马瘟病毒RT-PCR试剂盒

African Horse Sickness Virus(AHSV)

产品及特点

非洲马瘟病毒(African Horse Sickness Virus，AHSV)会引起非洲马瘟，是 一种马属动物的急性或亚急性传染病，该病以发热、皮下结缔组织与肺水肿以及 内脏出血为特征，只能通过昆虫传播。马对此病的易感性高，病死率高达 95%。 本病发生有明显的季节性和地域性，多见于温热潮湿季节，常呈地方流行或暴发 流行，传播迅速，因此灵敏快捷的诊断产品具有重要的意义。为此本公司开发了 本产品，可用于在科研领域快速定量检测非洲马瘟病毒。它具有下列特点：

1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。

2. 根据非洲马瘟病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。

非洲马瘟病毒RT-PCR试剂盒规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。 

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性 对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 非洲马瘟病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性 对照。制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。

二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）

3. 如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管（额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分： 

4. 上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:

5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物， 则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照必须有预期条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期 片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。