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当前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR-染料法>> 50次蜂房小甲虫PCR试剂盒
| 供货周期 | 一周 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | XY-0032 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 |
| 主要用途 | 荧光定量PCR具有更高的扩增效率、更高的扩增灵敏度、更高的扩增特异性。 |
蜂房小甲虫PCR试剂盒
Aeromonas spp
产品及特点
蜂房小甲虫（Aethina tumida）是蜂群的寄生虫。它的成虫和幼虫以蜂子、 蜂蜜和蜂花粉为食,导致幼蜂死亡、蜂蜜发酵及巢脾被破坏。小甲虫加速破坏蜂 巢,使成年蜜蜂逃逸。其损害程度可能取决于气候条件等因素,相比温度和湿度较 低的地区,蜂房小甲虫在较高的温度和高湿度下的危害一般更大。蜂蜜提纯设备 也是蜂房小甲虫潜在的繁殖场所,一旦蜂房小甲虫出现在这种设备中,这种危害 会更严重。从卵发育到成虫,蜂房小甲虫需要 3~12 周,周期长短取决于湿度、温 度和食物供应。成虫飞行时所到之处,所有规模的蜂群都会被侵扰，因此蜂房小 甲虫的快速检测具有重要的意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发，它具有下列特 点：
1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增蜂房小甲虫。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。 6. 本产品只能用于科研。
蜂房小甲虫PCR试剂盒规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR Magic Mix 3.0 | 1 mL（红盖） |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
试剂三 | 蜂房小甲虫 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
试剂四 | 蜂房小甲虫 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 天净沙核酸释放剂试用装 | 20 次（1mL、绿盖） |
试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 阳性对照的10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的天净沙核酸释放剂， 本产品的裂解液可以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管（2-7 管） |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
蜂房小甲虫 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
样品制备阴性对照（超纯水） |
| 18 μL |
|
| 蜂房小甲虫 PCR 的 1 万倍稀释液 | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （40个循环） | 95℃ | 15 sec |
| 55℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 60 sec | |
72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 109bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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