随机引物法DNA探针标记试剂盒 返回列表页

随机引物法DNA探针标记试剂盒产品及特点
本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即
用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结
合、在Klenow DNA聚合酶催化下，随机引物法DNA探针标记试剂盒引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸
三步组成，可用下面的示意图表示：
本产品在上述原理的基础上本产品的特点是：
1. 使用十聚引物，复性效率比六聚引物更高。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3. 快速，zui快1小时即可完成标记反应。
4. 所得DNA探针比活性高(对同位素可以达到10 9 cpm/ μ g DNA)，检测灵敏度
高。
5. 所需模板DNA量少（只需要10 ng以上即可），DNA可以是各种形状（线状和
环状）的、也可以是单链或双链的，长度在100 bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400 nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂
交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 三种标记选择，其中90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标
记，但需自备标记底物；90603B和90603C可分别用于生物素和地高辛标记。
使用及效果
将10ng-3 μ g的DNA模板在水（终体积不超过14 μ L）中变性5分钟后放冰上，
加入2 μ L 10×标记缓冲液、1 μ L Klenow exo-酶、1 μ L 标记核苷酸（A型中不提
供），混合后37℃保温1-20小时，加入1 μ L自备的0.5M EDTA终止反应。所得标
记探针可以直接使用或者放-20℃长期保存。120312-2500    末端脱氧核苷转移酶 (TdT)    2500U    1598    10-29
120312-500    末端脱氧核苷转移酶 (TdT)    500U    398    10-29
120401-100    热启动 Taq DNA 聚合酶    100U    157    10-3
120402-1    PCR LIC 克隆套装    1μg    990    6-17
120403-300    虾碱性磷酸酶    300U    597    10-54
120404-500    碱性磷酸酶，牛小肠    500U    397    10-53
120405-25    碱性磷酸酶，大肠杆菌    25U    150    10-52
120406-15    柱式植物叶绿体 DNAout    15 次    1990    2-58
120407-5000    S1 核酸酶    5000U    190    10-74
120408-1000    绿豆核酸酶    1000U    190    10-75
120409-50    BAL31 核酸酶    50U    190    10-71
120410-750    核酸外切酶 I    750U    190    10-89
120411-50    T4 DNA 聚合酶     50U    197    10-14
120412-5000    微球菌核酸酶    5000U    390    10-76