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纯度 | 99.99% | 供货周期 | 现货 |
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规格 | 100μl/支 | 货号 | XY9068 |
应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,农业 | 主要用途 | JM109(DE3)菌株来源于JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌 |
JM109(DE3) Chemically Competent Cell
产品规格x
JM109(DE3): 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
基因型
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqI qZΔM15](DE3)
JM109(DE3) Chemically Competent Cell产品说明
JM109(DE3)菌株来源于JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于JM109的染色体上,所以称为JM109(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。生产的JM109(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu /μg DNA。
操作方法
1. JM109(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA并用手打EP管底混匀,冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或
LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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