人白介素28B（IL-28B）（IFN-λ3）检测试剂盒 返回列表页

人白介素28B(IL-28B)(IFN-λ3)检测试剂盒

本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中IL-28B的含量。预先包被的抗体为IL-28B单克隆抗体。检测相抗体为IL-28B单克隆抗体，经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。
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检测指标：Interferon lambda-3；IFN-lambda-3；IFN-λ3；IFNλ3；Interleukin-28B；IL-28B；IL28B
检测范围：31.2pg/ml～2000pg/ml
特异性：系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性：＜2pg/ml

产品组成：

储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）。

人白介素28B(IL-28B)(IFN-λ3)检测试剂盒原理:

问：同一样品多次活性测试结果差异大怎么解决？

答：样本保存不当，会导致多次实验结果偏差较大，样本应尽量减少反复冻融，如需多次检测，需在取样后分装保存。

问：请问标曲是每次都要做吗？

答：是的，每次实验，孵育时间，洗板次数等等条件均不一样，不同实验的标曲不能混用，做一次实验需要做一次标准曲线，并且用当次，同一块板上的标准曲线结果去计算板内样品的浓度，才能得到准确的结果。

问：做预实验时每种要做几个复孔呀？

答：预实验视情况而定，如果整个板子孔数较为充足，建议两个复孔，如不充足，单孔也可以。要尽量保证实验过程中加样准确。比较吗？

答：可以比较，不同稀释比例，是因为不同样本间的表达差异较大，只要保证稀释后的检测样品测量值准确，还原回稀释倍数后的浓度是可信的。可以用来比较不同样本的原始浓度差。

问：试剂盒里面有捕获抗体么？

答：即用型ELISA试剂盒中，捕获抗体已经预包被至试剂盒中的ELISA板上，没有单独的捕获抗体提供，直接使用ELISA板孵育稀释后的样本及标准品即可。

问：ELISA实验中，检测计算抗原的浓度，临界值怎么确定？

答：根据曲线测定的浓度，建议落在标准曲线的中间位置较好，极限不要超过标准曲线的上下限，如果超出较多，会影响计算结果准确性，建议调整稀释比例。

问：In vivo周期长的话，不太好做预实验，怎么办？

答：In vivo造模取样后，可将样品分装，取一部分样品做ELISA预实验，剩余样品再进行正式实验；如多批次实验，操作较为一致，后续可取消预实验，根据前期结果进行ELISA实验浓度设置。

问：做实验前怎么知道待测血清中炎症因子的范围呢？多大是高多小是低？

答：需要根据文献推测，一般在健康人样本中，炎症因子表达很低，接近ELISA检测下限，样品无需稀释或1:1稀释即可，如已知为炎症疾病或造模样本，可参考文献，在预实验中设置1:10-100（或更高）的稀释比例，预实验检测后确定佳浓度进行正式实验。

问：ELISA实验中的洗板步骤如果没有洗板机，需要如何操作？

答：实验室ELISA实验做的较多，还是建议使用洗板机洗板，效果更好，也更方便控制。如果没有洗板机，在洗板过程中，需要注意洗板液添加后不要从孔中溢出，在加洗板液后，静置1-2min，甩干液体后，在吸水纸上大力拍干；重复三次。

问：ELISA实验中，酶标抗体识别的是哪个抗体？

答：在双抗夹心法ELISA中，酶标抗体识别的是检测抗体，对检测抗体进行识别和酶标记。

问：捕获抗体如何包被在96孔板上？

答：如果选用的是即用型ELISA试剂盒，无需进行抗体包被；如果是非即用型的ELISA试剂盒，首先，要选择ELIS*别的板子，材质应为聚苯乙烯；然后用抗体包被液稀释（pH9.6的碳酸盐缓冲液或pH7.2的PBS或pH7-8的Tris-HCl）成工作浓度，然后每孔加100 μl稀释后的捕获抗体，室温或4℃过夜包被，然后进行洗板和封闭之后即可使用，如需长期保存，需要真空冻干后保存

问：ELISA实验中的捕获抗体和检测抗体是同一个抗体么？

答：不是的，在双抗夹心法ELISA实验中，会同时用到捕获抗体和检测抗体，这两个抗体是针对同一抗原蛋白的不同抗原位点的两种抗体，这样才可以同时结合抗原分子。

问： ELISA可以测DNA的表观么？

答：不可以，ELISA是利用免疫学原理，定量检测蛋白质表达的技术。测DNA表观遗传学，主要是检测DNA甲基化，可以选用ChIP技术。