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ELISA 标准曲线制作方法
一般而言,我们拟合ELISA标准曲线选用比较经典的Curve Expert 1.3或者Curve Expert 1.4软件。现在我们以Curve Expert 1.4为例,对ELISA标准曲线绘制方法进行详述。
1. 点击Curve Expert 1.4,打开应用程序,截图界面如下:
2.在X轴输入标准品的OD值,Y轴输入相应的标准品的浓度,截图界面如下:
3. 单击上图界面中的 图标,出现如下界面
4. 单击上图界面中的ALL OFF 按钮,出现如下界面
5. 我们选择Sigmoidal Models这种曲线拟合模型进行ELISA标准曲线的拟合,点击OK,出现下图界面:
注意:上图界面中的r值越高,即当r值越接近1时,所拟合的曲线就越好,所得到的数值可靠性也就也高。
6. 在上图空白界面,按[Ctrl]键+[L]键,出现如下界面
在上图中输入相应的OD值(X值)后,点击Calculate即可计算出待测物的浓度(Y值),待测物稀释了多少倍就在所测值的基础上乘以稀释倍数即zui终浓度。
7. 点击所绘制的曲线图中左上方 按钮,可以得到如下ELISA曲线拟合方程
8. 点击下图中 Copy 即可得到上图界面中的曲线方程数据
Logistic Model: y=a/(1+b*exp(-cx))
Coefficient Data:
a = -1.19763443774E+004
b = -8.45403498052E+001
c = 1.30213993104E+000
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