小鼠肾足细胞系（株）传代基本技术

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞系（株）传代基本技术
1.选用细胞生长状态好(80-90%)的细胞进行传代。
2.吸除细胞培养液。用含双抗的1×PBS（pH7.4)清洗细胞培养
瓶2次。加入1ml 消化液至细胞培养瓶，轻轻摇动，使细胞消化
液刚刚覆盖细胞表面。注：消化液配比为：0.25%胰蛋白酶＋
0.02%EDTA。
3.将细胞培养瓶置于5%CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养数
分钟后，在显微镜下观察细胞的消化状态。注意：若贴壁细胞逐
渐趋于圆形或部分悬浮后，即可用手指轻轻拍打细胞培养瓶侧部
或底部使大部分贴壁细胞脱落，之后立即加入细胞终止液，终止
细胞消化。每种细胞的消化时间有差异，消化时注意观察，不要
消化太久。
4.吹打培养瓶中悬浮细胞若干次，吸出细胞悬浮液，转入15ml
离心管中，800rpm 离心5分钟。
5.弃离心管中上清液，加入细胞培养液重悬细胞。细胞计数，确
定细胞数量。
6.细胞分瓶后，加入适量细胞培养液至细胞培养瓶中，置于
5%CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养24小时。