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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 货号 | 13650ES50 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品介绍
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） | *（元） |
Hifair® V C58P2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) | 13650ES50 | 50 T | 1705.00 | 480.00 |
13650ES60 | 100 T | 3065.00 | 880.00 | |
13650ES80 | 1000 T | 24065.00 | 7800.00 | |
13650ES92 | 10000 T | 185765.00 | 68000.00 |
产品描述
Hifair® V C58P2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer，Enzymes Mix 等，缓冲液中已含有Mg2+和 dNTP , 有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多重扩增反应。并添加了dUTP/UDG 系统，可有效防止气溶胶污染的风险。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |||
13650ES50 (50 T) | 13650ES60 (100 T) | 13650ES80 (1000 T) | 13650ES92 (10000 T) | ||
13650-A | 2×Hifair® V C58P2 MP Buffer | 750 μL | 1.5 mL | 15 mL | 150 mL |
13650-B | Hifair® V C58P2 Enzyme Mix | 60 μL | 120 μL | 1.2 mL | 12 mL |
【注】：1) 2×Hifair® V C58P2 MP Buffer 为Hifair® V C58P2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer 的简写,其中包含dNTPs,dUTP, Mg2+ , stabilizers和enhancers等。
2) Hifair® V C58P2 Enzyme Mix 主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase和UDGase。
适用机型
需添加High Rox适用机型： ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
需添加Low Rox 适用机型： ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要Rox校正的仪器型号：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
反应体系（以30 μL为例）
组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
2×Hifair® V C58P2 MP Buffer | 15 | 1× |
Hifair® V C58P2 Enzyme Mix | 1.2 | - |
Primer/Probe Mix (2.5 μM) | 3 | 0.25 μM |
模板RNA | 1-10 | - |
RNase Free H2O | to 30 | - |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物探针混合液浓度：Primer/Probe Mix 中包含多对引物和探针，通常每条引物终浓度可以根据情况在 0.1-1.0 μM 间进行调整；探针终浓度也可以根据对荧光曲线和荧光增峰的要求在 0.05-0.5 μM范围内进行调整。
b) 模板稀释：qPCR灵敏度*，建议将模板进行稀释使用，控制Ct值在20-35之间适宜。
c) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
1 | 逆转录 | 50℃a | 20 min | 1 |
2 | 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
3 | 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 40-45 cycles |
60℃b | 30 secc |
【注】：
a) 逆转录：42℃或者55℃均可。
b) 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c) 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。
HB210918
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