红细胞稀释液

红细胞稀释液公司正在销售的产品：豚鼠微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)试剂盒Anti-MMP14 AntibodyWolfram综合征蛋白1抗体
豚鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)试剂盒Anti-MMP16 Antibody磷酸化赖缺陷型蛋白激酶1抗体
豚鼠蛋白S(PROS)试剂盒Anti-MMP16 AntibodyWNK4抗体
豚鼠心钠肽(ANP)试剂盒Anti-MMP2 Antibody

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：细胞染色

储存条件：室温,12个月

用途：用于红细胞计数

注意事项：由柠檬酸钠，甲醛等组成。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

骆驼蓬碱;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品) Sulfaquinoxaline接头蛋白Gab 1抗体包装5g

骆驼篷子（标准品） Sulfalozine sodium磷化糖原合激3α抗体包装25g

落花生枝叶（标准品） Tiamulin磷化神经生长相关蛋白43抗体包装5g

落新妇苷(标准品) Cesium iodide糖原合激-3β抗体包装100g

麻枫树B（标准品） 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone抗粘附多肽抗体包装25g

（草）（标准品） Dimethyl sulfoxide脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体包装500g

（中）（标准品） Dodecyltrimethylammonium chloride神经膜糖蛋白M6a包装5g

根（标准品） Methyl ArachidateG蛋白偶联受体101抗体包装250mg

麻醉椒苦 Polyamide胰高血糖样肽-1受体/GLP-1受体抗体包装1g

麻醉椒 Polyamide糖磷脂酰肌抗体包装5g

马鞭草（标准品） Polyamide磷化gp130抗体包装25g

马勃（标准品） Sodium phosphate dibasic dihydrateS转移ζ1抗体包装5g

马齿苋（标准品） Sodium sulfate anhydrous甘-N-酰基转移抗体包装25g

马兜铃(北马兜铃)（标准品） Sodium sulfate anhydrous甘-N-酰基转移样1抗体包装5g

马兜铃A(标准品) Sodium bicarbonate 转运蛋白G3PP抗体包装1g

青霉菌Penicillium│sp． 质量规格：>99%,BR,可用于培养 前动力蛋白1试剂盒白绵马AA;Albaspidin AA

宇佐曲霉Aspergillus usamii 质量规格：>98%,标准品前病整合位点1试剂盒绵马ABA;Filixic acid

奇迹束丝放线菌Actinosynnema│mirum 质量规格：>900 mcg/mg,BR,可用于培养葡萄糖转运蛋白4试剂盒麻醉椒苫;methysticin
红细胞稀释液Neurocan  神经粘蛋白抗原规格： 0.5mg

NF2/merlin(neurofibromatosis type 2)  2型神经纤维瘤抗原规格： 0.5mg

NFATc1  活化T细胞核因子1蛋白规格： 0.5mg

phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  磷suan化细胞核因子/磷suan化k基因结合核因子抗原规格： 0.5mg

NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  细胞核因子50/κ基因结合核因子50抗原规格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。