详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。 测定原理 植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,超声溶解器,回旋式振荡器。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321355 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
大肠埃希菌卷曲螺旋结构域蛋白11抗体Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人抑制βA(INHBA)免疫试剂盒
巨大芽孢杆菌中心体蛋白55kDa抗体Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人抑制B(INH-B)免疫试剂盒
地衣芽胞杆菌富含半胱与表皮生长因子样蛋白2抗体Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人抑制A(INH-A)免疫试剂盒
谢瓦曲霉骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)免疫试剂盒
草假单胞菌染色质修饰蛋白4B(4C)抗体Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)免疫试剂盒
弗氏链霉菌磷化受体酪激c-Abl抗体Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)免疫试剂盒
木菇属磷化受体酪激c-Abl抗体Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗体免疫试剂盒
瓜果腐霉磷化受体酪激c-Abl抗体Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫试剂盒
酿酒酵母酪蛋白激1γ2抗体Human CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫试剂盒
优毡被菌柯萨奇病蛋白受体B抗体Human DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)免疫试剂盒
黄色孢链霉菌肿瘤抑制因子FBW7抗体Human pro-ET1(Pro-endothelin 1) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)免疫试剂盒
克罗诺杆菌属粘附分子4抗体Human S100 Protein ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)免疫试剂盒
嗜热侧孢霉钙调蛋白结合转录激活因子1抗体Human KCND3(Potassium voltage-gated channel subfamily D member 3) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫试剂盒
罗伦隐球酵母周期依赖性激5激活结合蛋白C53抗体Human PCOL-I(Procollagen I) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫试剂盒
开菲尔乳杆菌着丝粒蛋白H抗体Human FOXM1(Forkhead box protein M1) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)免疫试剂盒
毕赤酵母半胱蛋白抑制剂6抗体Human TGT(tRNA-Guanine Transglycosylase) ELISA Kit人异质性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)免疫试剂盒
棒状杆菌Corynebacterium│ 质量规格:>99%,BRI 型胶原蛋白试剂盒3-O-基没食子
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BRH-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白试剂盒5-基-7-氧基异黄
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 质量规格:>98%,BRHSP60 IgM抗体5-基糠
植酸酶测试盒50管/24样大肠埃希氏 4-硝基邻苯二甲酸酸性成纤维生长因子Elisa
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