化工仪器网
详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321395 |
商品介绍：
测定意义 乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。 测定原理 乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
节杆菌肉碱棕榈酰基转移2抗体Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit人碱性亮链转录因子ATF样蛋白(BATF)免疫试剂盒
丛毛单胞菌肉碱氧位甲基转移抗体Human KL(Klotho) ELISA Kit人碱性成纤维生长因子(bFGF)免疫试剂盒
香气红冬孢锁掷孢酵母IV型胶原α3结合蛋白抗体Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA Kit人间皮(MSLN)免疫试剂盒
柠檬原小单孢菌肉碱棕榈酰基转移1B抗体Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit人间变性淋巴瘤激(ALK)免疫试剂盒
牛肝菌胆固27α羟化抗体Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit人间α-抑制因子重链H1(ITIH1)免疫试剂盒
大肠埃希氏杆菌胆固24α7羟化抗体Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit人间-alpha-抑制剂重链H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)免疫试剂盒
酿酒酵母色P450 4A1抗体Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit人假定蛋白LOC677168 免疫试剂盒
布氏白僵菌（卵孢白僵菌）色P4504A22抗体（脂肪Ω羟化）Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit人离子通道蛋白抗体免疫试剂盒
肠产性大肠埃希氏菌周期蛋白依赖性激抑制剂2D抗体Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人甲状腺抗体免疫试剂盒
谷棒杆菌胆固24S－羟化Human APLN(Apelin) ELISA Kit人甲状腺抗体(TAb)免疫试剂盒
云芝栓孔菌 (变色栓菌)猪瘟病抗体Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人甲状腺(T4)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌色c氧化亚型2抗体Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit人甲状腺球蛋白(TG)免疫试剂盒
芹侧耳（杏鲍菇）周期G2抗体Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit人甲状腺结合球蛋白(TBG)免疫试剂盒
巨型艾耳球虫铜蓝蛋白抗体Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit人甲状腺激受体β(THRb)免疫试剂盒
嗜热链球菌CUE结构域蛋白2抗体Human SOD2(Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial) ELISA Kit人甲状腺过氧化物(TPO)免疫试剂盒
瑟氏泰勒虫（清水株）线粒体复合物NDUFS1蛋白抗体Human LPCAT2(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2) ELISA Kit人甲状腺肽激抗体(THAA)免疫试剂盒
AS3.582资源名称: 肉桂色曲霉 质量规格：IND罗汉果黄
NRRL330=AS3.795资源名称: 黑曲霉 质量规格：ACS reagent,95 %罗汉果皂苷IIIe
中国台湾根霉Rhizopus│formosensis 质量规格：指示剂
乙醇酸氧化酶测试盒50管/48样球色单隔孢属 4-溴三苯Ⅳ-C型胶原Elisa
植物乳杆 4-羟基吡咯并[2,3-d]嘧啶雌受体αElisa
登户链霉 6--7-氮杂色-2,3-双加氧Elisa
海考克氏 2,4-二氟-5-甲酸Ca-ATPElisa
枯草芽孢杆 2--4-FK506结合蛋白4Elisa
黑曲霉 2,4-双(三氟甲基)苯促性腺释放受体Elisa
赭曲霉 2-溴-5-硝基三氟甲苯抗肽LL-37Elisa
柿瑞恩氏酵母 4-甲氧基苯甲酰乙超敏心肌肌钙蛋白ⅠElisa
放射型根瘤 4--3-氟苯X型胶原Elisa
都浓哈马达氏 3,4-二氨基甲酯Ras相关C3肉底物1Elisa
苏云金芽孢杆 4-叔丁基苯肼盐酸盐组蛋白脱乙酰基4Elisa
局限青霉 二甲基三硫脂肪酸结合蛋白Elisa
胶胞 氮杂环丁烷盐酸盐微纤丝关联蛋白4Elisa
草菇 2,3-二酸甲酯平滑肌肌球蛋白2AElisa
链霉 邻苯二甲酸二庚酯肌特异性增强子因子2CElisa
化工仪器网