Taq DNA Polymerase

Taq DNA Polymerase公司正在销售的产品：Anti-SCAF4 Antibody人抗Q热抗体
Anti-SCAF4 Antibody小鼠雌三
Anti-SCAMP1 Antibody大鼠球蛋白A
Anti-SCAF4 Antibody小鼠雄烯二酮
Anti-SCAF8 Antibody大鼠球蛋白E
Anti-SCARF2 Antibody人抗多发性肌炎硬皮病抗体
Anti-SCAND

产品分类：PCR相关

储存条件：—20℃,36个月

用途：耐热Taq DNA聚合酶

注意事项：附送10x PCR buffer,Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermusaquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为94 KD。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性,无3’→5’核酸外切酶活性。在PCR反应中,该酶的延伸速度为1-2kb/分钟,PCR产物3’端带A,可直接用于T/A载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组DNAᲂ

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

 

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

球芽孢杆菌谷受体2C抗体（N端）Human CNTF(Ciliary neurotrophic factor) ELISA Kit碱性成纤维生长因子4(bFGF-4)

弯孢菌癌/抗原58抗体Human FLT3(Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3) ELISA Kit碱性成纤维生长因子(bFGF)

解淀粉芽孢杆菌霍奇金淋巴瘤重复蛋白3抗体Human LIF(Leukemia inhibitory factor) ELISA Kit间皮(MSLN)

灰黄青霉增殖相关核仁抗原抗体Human PDGFA(Plaet-derived growth factor subunit A) ELISA Kit间变性淋巴瘤激(ALK)

云南假诺氏菌NALP12抗体Human ABCG1(ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit间α-抑制因子重链H1(ITIH1)

琥珀乳牛肝菌富含亮重复结构域蛋白6抗体Human ACA-IgG(Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit间-alpha-抑制剂重链H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)

细囊壳富含亮重复结构域蛋白7抗体Human ACC(Acetyl-CoA Carboxylase) ELISA Kit甲状腺抗体(TAb)

微小链霉菌富含亮重复结构域蛋白9抗体Human B2M(Beta2-microglobulin) ELISA Kit甲状腺(T4)

季也蒙假丝酵母富含亮重复结构域蛋白10抗体Human MUC-1(Mucin-1) ELISA Kit甲状腺球蛋白(TG)

球毛壳菌（可订购）钠钙交换蛋白2抗体Human ACAT2(Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2, cytosolic) ELISA Kit甲状腺抗体(TAb)

烟色小菌核链霉菌抑癌基因NDRG2抗体Human IGFBP-5(Insulin-like growth factor-binding protein 5) ELISA Kit甲状腺结合球蛋白(TBG)

孟氏假单胞菌DNA损伤关蛋白1抗体Human sRAGE(Solube Receptor for Advanced Glycation End product) ELISA Kit甲状腺激受体β(THRb)

假单胞菌伴肌动蛋白抗体Human CALM1(Calmodulin) ELISA Kit甲状腺过氧化物(TPO)

草木樨中华根瘤菌抑癌基因NDRG4抗体Human GFAP(Glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit甲状腺肽激抗体(THAA)

绿僵菌NK受体2A抗体Human IgA(Immunoglobulin A) ELISA Kit甲状腺激免疫球蛋白(TSI)

芹侧耳（杏鲍菇）一氧化氮合成-2抗体（诱导型）Human IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit甲状旁腺激样蛋白(PLP)

黄海芽孢杆菌Bacillus│marisflavi 质量规格：20000U/g,BR黄芪总皂苷

阴沟肠杆菌Enterobacter│cloacae 质量规格：BR,6万U/G葛根

茯苓Poria│cocos 质量规格：>95%,BR,M.W:80万-150万鬼臼
Taq DNA PolymeraseF II (Mouse coagulation factor II ) ELISA Kit  小鼠Ⅱ规格： 48T

ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit  小鼠内毒su规格： 48T

ANP(Mouse Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  小鼠心钠肽规格： 48T

PPAR- Gamma(Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  小鼠过氧化物mei体增殖因子活化受体γ规格： 48T

TSST-1(Mouse toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit  小鼠毒性休克综合征毒su1规格： 48T