详细介绍
参数规格:
产品名称:DiD三氟甲磺酸盐
货号:FSP184
产品规格:10 mg
分类:荧光核酸试剂
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
产品仅用于科研本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
探针法:
aqMan 探针是一种寡核苷酸探针,它的荧光与目的序列的扩增相关。它与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。荧光基团连接在探针的5’ 末端,而淬灭剂则在3’ 末端。当完整的探针与目标序列配对时,荧光基团发射的荧光因与3’ 端的淬灭剂接近而被淬灭。但在进行延伸反应时,聚合酶的5’ 外切酶活性将探针进行酶切,使得荧光基团与淬灭剂分离。随着扩增循环数的增加,释放出来的荧光基团不断积累。因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。相对于染料法,Taqman探针法具有更高的特异性和准确性。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
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DiD三氟甲磺酸盐Pleurotus│eryngii分离基物: 腐朽木斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 食用菌培养基: 17生长条件: 20℃存储条件: 定期移植法
Sporobolomyces│beijingensis分离基物: Athyrium kusnezoffii冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0013生长条件: 17℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Saccharomyces│cerevisiae冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 肥料培养基: 0013生长条件: 26℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
解淀粉类芽孢杆菌种属: Paenibacillus│amylolyticus分离基物: 土壤冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 0002生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Pseudomonas│aeruginosa冻干物安全等级: 2模式菌株: no培养基: CM0002生长条件: 37℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
季也蒙毕赤酵母种属: Pichia│guilliermondii冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0013生长条件: 25-28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Rhodosporidium│sphaerocarpum分离基物: 水样/海水斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 近海酵母培养基: 513生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法
谷氨酸棒杆菌种属: Corynebacterium│glutamicum冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产L-色氨酸。培养基: CM0002生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Sulfolobus│islandicus冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 在古菌内表达GST-PCNA3培养基: 453生长条件: 80℃存储条件: 真空冷冻干燥法;定期移植法
操作程序:
产品仅用于科研由您提供该实验中目的基因的相关资料(如:基因名称、序列等信息),我们共同探讨服务的可能性和技术路线;
商定服务收费、付款方式、服务期限等,并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本(100mg组织或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样本PCR所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成(费用另计)。如果由您自己提供,必须是PAGE纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。
提供实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。