详细介绍
产品分类:微生物染色
储存条件:室温,24个月
用途:改良的细菌革LAN染色
注意事项:conn改良Weigert革LAN染色液的一种
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
草酸铵结晶紫染色液 | 100ml | FS-R7064 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
平菇胰辅脂抗体Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羟甲基戊二单酰还原(HMG-CoAR)免疫试剂盒
螺卷毛壳19号染色体开放阅读框45抗体Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羟甲基戊二单酰(HMG-CoA)免疫试剂盒
鲜绿青霉过氧化氢诱导转录蛋白1抗体Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羟基赖正己(HLNL)免疫试剂盒
酿酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗体Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羟脯(Hyp)免疫试剂盒
米曲霉第12号染色体开放阅读框23抗体Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人强啡肽(Dyn)免疫试剂盒
酿酒酵母γ-连环/连接蛋白γ抗体Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)免疫试剂盒
日勾维肠杆菌10号染色体开放阅读框4抗体Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潜伏膜蛋白1(LMP-1)免疫试剂盒
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黄色短杆菌10号染色体开放阅读框81抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纤维蛋白1抗体免疫试剂盒
猴头菌19号染色体开放阅读框47抗体Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纤维蛋白1免疫试剂盒
金黄壳囊孢19号染色体开放阅读框54抗体Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前铁调(Pro-Hepc)免疫试剂盒
贝雷丝孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖转移1抗体Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫试剂盒
球孢白僵菌19号染色体开放阅读框18抗体Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫试剂盒
总状毛霉19号染色体开放阅读框21抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫试剂盒
沼泽红假单胞菌19号染色体开放阅读框24抗体Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙抗体Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫试剂盒
葡萄穗霉属Stachybotrys│sp. 质量规格:>98%,BRB连接蛋白试剂盒橙花
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BRB活化因子受体试剂盒长梗秦艽
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BRB活化因子试剂盒常山乙
草酸铵结晶紫染色液IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介su受体相关激mei规格: 48T
UK(Human urokinase) ELISA Kit 人尿激mei规格: 48T
PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷suan烯chun式丙tongsuan羧激mei规格: 48T
Human trypsin ELISA Kit 人胰蛋白mei规格: 48T
BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉样前体蛋白裂解mei1规格: 48T