土壤全钛含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC3050

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液配制：

1、 提取液：自备试剂，临用前根据实验所需量按照浓盐酸（mL）：蒸馏水（mL）=1:1的比例进行配制，现用现配，常温保存。大约需要500mL。

2、 试剂二：临用前加入16mL蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂2-8℃保存4周。

3、 标准品：10μmol/mL钛标准液。

产品说明：

钛是自然界广泛存在的过渡金属元素，与铁元素紧密共生，二者存在一定的相关性，土壤中钛对植物有极其重要的生理作用，充足的钛可保证植物结实率提高，空瘪率减少，并增强植物的抗害效果。

在酸性条件下，二安替比*甲烷与钛离子生成黄色络合物，在390nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与钛离子浓度成正比。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、马弗炉、坩埚、坩埚钳、台式离心机、水浴锅、研钵、100目筛、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓盐酸（37%）、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、取新鲜土样烘干，过100目筛；

2、按照土壤质量（g）：试剂一质量（g）为 1：5的比例（建议称取约0.1g土样，加入0.5g试剂一）缓慢加入试剂一于坩埚中，边加边搅拌均匀；

3、然后在马弗炉中900℃熔融30min；

4、趁热取出坩埚，加入10mL提取液溶解熔块，必要时加盖，防止溶液溅出，至溶解全；

5、最后10000g，25℃离心10min，取上清液待测。

二、测定步骤

1、 可见分光光度计预热30min以上，调节波长至390nm，蒸馏水调零。

2、 标准品的稀释：临用前按下表将标准品用蒸馏水稀释为5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.0390625μmol/mL的标准品待测。

3、 标准品稀释表：

每管需要200μL。

4、 操作表：（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）

三、土壤全钛含量的计算

1、 标准曲线的绘制

根据标准管的浓度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线y=kx+b。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（x，μmol/mL）

2、土壤全钛含量计算

全钛含量（mg/kg）= x ×V样×47.867÷1000÷（W÷1000×V样÷V样总）

= 478.67x÷W

V样：反应体系中加入样本体积，0.2mL；V样总：加入提取液体积，10mL；W：样本质量，g；47.867：Ti原子量；第一个1000：单位换算1ug=10^-3 mg；第二个1000：单位换算，1g=10^-3kg。

注意事项：

如果测得吸光值ΔA＞1.7，建议客户将样本上清液用蒸馏水稀释后重新测定，注意计算公式乘上稀释倍数；如果测得吸光值过低或接近空白值，建议客户加大样本量后重新测定，注意同步修改计算公式。

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