谷*甘肽还原酶（GR）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC1160
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前加入3mL蒸馏水溶解备用，2-8℃可保存4周；

2. 试剂三：试剂存于试剂瓶内玻璃瓶中；临用前加入6mL蒸馏水溶解备用，-20℃可分装保存4周，避免反复冻融。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、移液器、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、1mL石英比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 样本处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，匀浆液避免反复冻融；

2. 测定前须先用1-2个样做预实验，哺乳动物组织一般须用试剂一稀释2-5倍；

3. 由于试剂一中含有一定浓度的蛋白（约0.1mg/mL），所以在测定样本蛋白浓度时需要减去试剂一本身的蛋白含量。

实验实例：

1. 取0.1g桃树叶片加入1.0 mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清液稀释4倍按测定步骤检测，ΔA测定管=A测1-A测2=1.033-0.953=0.08，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按样本质量计算酶活得：GR酶活(U/g 质量)=0.536×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷W×4（稀释倍数）=1.587 U/g 质量。

2. 取0.1g大鼠肝脏组织加入1.0 mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清液稀释8倍按测定步骤检测，ΔA测定管=A测1-A测2=0.886-0.533=0.353，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按样本质量计算酶活得：GR酶活(U/g 质量)=0.536×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷W×8（稀释倍数）=14.88 U/g 质量。

相关发表文献：

1. Hua Li,Lanying Wang,Yanping Luo. Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (−)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan. Molecules. October 2018;(IF3.06)

2. Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of Plant Physiology.October 2018;(IF2.825)

3. Li S, Tian Y, Wu K, et al. Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture[J]. Nature, 2018, 560(7720)：595-600.

参考文献：

1. Demiral T, Türkan I. Comparative lipid peroxidation, antioxidant defense systems and proline content in roots of two rice cul  tivars differing in salt tolerance[J]. Environmental and experimental botany, 2005, 53(3): 247-257.

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