外切β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（C1）活性检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号：BC4300

规格：50T/24S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一：临用前取1瓶加入7 mL蒸馏水溶解备用，现用现配；用不完的试剂2-8℃保存4周；

2、 标准品：5 μmol/mL *溶液。

产品说明：

β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（C1，EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是微生物纤维素降解酶系的主要组分，也是水解天然纤维素的必需组分，C1酶作用于纤维素线状分子的末端，水解β-葡萄糖苷键，每次切下1个纤维二糖分子。C1能够催化对硝 基苯纤维二糖苷 （PNPC）生成对硝 基苯*，后者在400 nm有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1 mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管和蒸馏水。

操作步骤：具体操作步骤请查看产品附件

注意事项：

1、若吸光度大于1时，建议将样本用提取液稀释后进行测定。计算公式乘以稀释倍数。

实验实例：

1、 取0.1g金针菇进行样本处理，离心取上清稀释5倍后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.531-0.006=0.525，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.305，根据样本质量计算酶活得：

C1（U/g 质量）=250×ΔA测定÷ΔA标准÷W×5（稀释倍数）=250×0.525÷0.305÷0.1×5=21516.4 U/g 质量。

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