ELISA的基本原理

酶联免疫吸附实验（ELISA）顾名思义就是以酶作为符号指示物、以抗原抗体免疫反响为基础的固相吸附测定办法。因而，一个ELISA测定试剂，其有机组成部分包含三个方面，即固相支持物及包被的抗原或抗体、酶符号的抗体或抗原和酶反响底物等。抗原或抗体的固相化并不影响其免疫结合活性，酶符号的抗体或抗原亦是如此，而且符号酶的活性不因符号进程而损失。整个测定中，抗原抗体结合反响在固相支持物上进行，反响结果的判断以酶与其底物效果后的显色或产生荧光或发光反响为准则，显色或产生荧光或发光的强度与临床标本中待测物的浓度成正比或反比。目前国内的ELISA试剂盒均以酶的显色反响来完结测定。

反响体积
此处的反响体积并非是微孔中的液体体积，而是固相免疫测定中与固相包被的抗体或抗原有触摸的部分，这部分体积到底有多少，很难测定，但比反响管中总液体体积要少得多。固相抗原抗体反响发生于液体—固相界面，可能处于一级结合键的引力距离内，小于10nm。液相中待测抗原或抗体要进入到这个结合界面，需求分散或质量搬运。微颗粒的反响外表区域较微孑L要大得多，因而处于抗原抗体结合界面的体积占总反响体积的比例亦高得多。因而，结合反响的效率更高。这也是全自动化免疫测定分析仪均选用微颗粒固相的重要原因之一。

微孔内特异抗体的免疫测定  
运用吸附的杂乱抗原进行微孔内特异抗体的免疫测定，与液相测定相比，有明显的亲和力依赖性，固相受体—配体相互效果的稳定性好像与微孔内特异抗体的免疫测定亲和力依赖性和极低比例的所捕获的总抗体相对立

固相上抗原抗体相互效果的免疫化学

固相上抗原抗体结合反响所需求的时刻一般，固相免疫测定如ELISA中抗原抗体结合到达平衡所需求的时刻，要大于液相免疫测定，并随液体所占体积与界面抗体或抗原受体所占体积比的添加而添加。当在微孑L板孔内进行免疫测守时，界面反响动力学显示其对分散效果有很强的依赖性，分散性越强则反响所需时刻越短，结合越充沛。这一点可经过旋转振动来到达，微孔的旋转振动可促进液体进入到可与抗体或抗原包被界面触摸的较小的区域内。也可在微孔中放一个慵懒的塞子以使反响液体成为一个小体积，或运用一个具有大外表的多孔的基质如硝酸纤维素，或运用微颗粒来做到这一点。