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细胞生长曲线测定的原理和方法

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   公司承接各种实验代做外包服务:石蜡包埋、免疫组化、HE染色、PAS染色、DNA提取、RNA提取、探针、SNP检测、WBEMSACCK8检测、细胞凋亡、细胞周期检测、流式、质粒转染、ROS活性氧检测、线粒体膜电位检测、平板克隆、软琼脂克隆、细胞划痕、细胞粘附,并为广大科研用户提供各种高品质的高*_端化学试剂、生物学试剂、免疫学检测,ELISA试剂盒(免费代测)、生化试剂盒、分析标准品、对照品、标准物质食品安全检测试剂、动物疫病类检测产品兽药残留检测试剂、细胞培养服务等,应用覆盖药物分析领域、食品安全领域、聚合物研究领域、环境监测领域,客户广泛分布于食品、制药、第三方检测、环境测试机构、化工、科研院校、生物工程等行业。


主营:

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2.ELISA试剂盒、分离液、分离液试剂盒

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各种实验代做:WB代做,免疫组化,PCR代做,细胞检测,食品安全检测试剂,兽药残留检测试剂,动物疫病类检测,销售高品质标准品,对照品,ELISA试剂盒,细胞,血清,等等

应用领域 医疗卫生,生物产业

细胞生长曲线的测定实验目的

掌握绘制细胞生长曲线的原理和方法

细胞生长曲线的测定背景与原理

生长曲线是测定细胞生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。--般细胞传代之后,经过短暂的悬浮后贴壁,随后渡过长短不同的潜伏期,即进入快速生长的指数生长期。在细胞达到饱和密度后,停止生长,进入平台期,然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,需连续对细胞进行计数。通常计数6天。为准que起见,一般每次实验设3个平行重复。

[材料、试剂与仪器]

1、实验材料:

Hela细胞系。

2、实验试剂:

DMEM培养基(青霉素,链霉素,10%血清) ,0.25%胰蛋白酶溶液, 台酚蓝染液。

3、实验仪器:

超净工作台,CO2培养箱,倒置显微镜,微量移液器,血细胞计数板,培养瓶,离心管,移液管,废液缸,盖玻片, 24孔板。

[方法与步骤]

1、取生长良好的细胞,用培养基制成细胞悬液后计数。根据细胞计数结果按5x104/mL作传代培养接种于24孔板中,共接种21孔细胞。1 m/孔。余下三孔可设传代培养的对照。

2、24h后每天记录细胞数目,每次取3孔细胞,分别进行计数。计算平均值。连续计数7d。细胞用胰酶消化后加入一定量的培养基,混匀制成细胞悬液。取少量悬液与台酚蓝1:1混台。取一干净的血细胞计数板,盖上盖片,从盖片两边滴入细胞悬液使之充满计数板和盖片之间。注意滴液勿有气泡,也不能太多,否则会使盖片浮起而使细胞计数不准。

3、低倍镜下观察,活细胞不着色,台盼蓝着色的细胞呈深蓝色,是不健康或已死亡的细胞,不能计数。

找出计数板上的方格,计算四角大格内总细胞数,大格线者只计左侧和上方,不计右侧和下方细胞悬液中细胞

密度计算公式为:细胞数/mL= (四角大格内细胞数/4) x104x2

4、根据细胞计数结果,以单位细胞数(细胞数/mL)为纵坐标,以时间为横坐标绘制生长曲线。

 

细胞黏附能力实验服务

细胞荧光染料标记检测实验

 

实验代做服务:

 

免疫组化IHC染色实验服务

细胞、组织TUNEL凋亡染色实验服务

试剂盒免费代检测

实验室代做实验项目

 

透射电镜服务实验服务

石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡

核仁组成区嗜银-AGNOR染色实验服务

免疫共沉淀(CHIRP)实验

RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验代做

酶联免疫(ELISA)技术服务

鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒

喹诺酮类快速检测试剂盒

组织芯片/微阵列定制技术服务

 

染色质免疫沉淀分析(CLIP)实验服务

 

多因子液相芯片技术(Luminex)实验

免疫细胞化学ICC实验服务

ATP/ADP检测实验服务

蛋白双向(2-D)电泳实验服务

蛋白相互作用分析

碱性磷酸酶染色实验服务

PKC活性检测实验

非标定量实验

(Label-free)

 

DIGE技术实验服务

端粒酶活性检测实验

细胞生长曲线的测定

扫描电镜服务

NF-KB p65活性检测实验

 

慢病毒包装实验服务



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