MIC-CELL-0070 小鼠淋巴成纤维细胞
参考价 | ¥3580.00 |
- 公司名称 武汉钬飞生物科技有限公司
- 品牌其他品牌
- 型号MIC-CELL-0070
- 所在地武汉市
- 厂商性质生产厂家
- 更新时间2021/3/22 15:58:00
- 访问次数 248
5*10^5 | 3580.00元 | 50 瓶 可售 |
联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!
供货周期 | 两周 | 规格 | 5*10^5 |
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货号 | MIC-CELL-0070 | 主要用途 | 科研 |
小鼠淋巴成纤维细胞运输和保存
发送复苏存小鼠淋巴成纤维细胞方式:
(1)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时。具体操作见细胞培养步骤。
(2)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞接受后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的*培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备基础培养基100%;北美胎牛血清5%,添加剂1%;双抗1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×105进行传代。
2)吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。
3)3ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。
注:推荐客户用钬飞生物原代细胞消化液。
4)细胞培养瓶置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养2分钟后,在显微镜下观察原代细胞的消化状态。
请记住:如贴壁细胞逐渐趋于圆形、部分悬浮后,用手指轻轻拍打细胞培养侧部至大部分贴壁细胞悬浮,加入3ml血清终止液,终止细胞消化。每种原代细胞的消化时间是有差异的。
5)吹打培养瓶中悬浮细胞若干次,再吸出细胞悬浮液,转入15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。注:推荐客户用钬飞生物原代细胞培养体系。
6)弃离心管中液体,加入原代细胞培养液重悬细胞。细胞计数,确定细胞数量。
7)细胞分瓶后,加入适量原代细胞培养液至细胞培养瓶中,置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养24小时。
下面T25瓶为类;
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
配套培养体系(500ml/套) | ||
货号 | 名称 | 价格 |
MED-SUP-0002 | 内皮细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0003 | 平滑肌细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0002 | 内皮细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0003 | 平滑肌细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0001 | 上皮细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0013 | 神经元细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0014 | 神经胶质细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0002 | 内皮细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0004 | 成纤维细胞培养体系 | ¥3,580 |
MED-SUP-0014 | 神经胶质细胞培养体系 | ¥3,580 |