HaloTag亲和试剂-融合蛋白

HaloTag亲和试剂-融合蛋白

HaloTag亲和试剂-融合蛋白

HaloTag®*是来自红球红球菌的细菌卤代烷脱卤酶的改良变体  。它被设计成与基于反应性氯烷的配体形成共价键。当与目标蛋白质靶标融合时，该专门的反应位点可进行多种生物化学和细胞实验，例如亚细胞定位，酶促测定等。

生化分析的一个重要方面是直接从表达该构建体的细胞中获得HaloTag蛋白。Halo-Trap是一种高质量的HaloTag结合蛋白，与琼脂糖珠偶联，用于HaloTag融合蛋白及其相互作用伙伴的超高亲和力纯化。使用Halo-Trap，即使共价结合到HaloTag配体（例如荧光染料）上，也可以免疫沉淀HaloTag-fusion蛋白。HaloTag融合蛋白甚至无需蛋白酶即可洗脱！这种多功能的亲和试剂与免疫沉淀，Co-IP，质谱和酶活性测量兼容。

Halo-Trap可以进行细胞成像和生物化学纯化。
输入（I），未结合（FT）和结合（B）的级分通过SDS-PAGE分离，然后进行考马斯亮蓝染色，蛋白质印迹和荧光扫描。由于Halo-Trap在其催化中心外的表位上与HaloTag结合，因此以类似的效率捕获了未结合的HaloTag融合蛋白（左）和与诸如HaloTag TMR之类的配体共价结合的HaloTag融合物。这种从细胞中进行的超高效，一步纯化，使成像和纯化成为可能。现在，也可以纯化用HaloTag配体处理的细胞进行成像，以进行生化研究-使HaloTag系统像GFP-Trap系统一样具有广泛的表达能力。