11121ES60 Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit （gDNA
- 公司名称 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型号 11121ES60
- 产地 上海
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2021/9/27 14:48:11
- 访问次数 1896
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
分子生物学试剂，细胞生物学试剂，免疫学试剂，蛋白组学试剂等
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 货号 | 11121ES60 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) | 11121ES60 | 100 T | 935.00 |
产品描述
Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)是含有gDNA去除步骤的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒基于Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase而开发。该酶热稳定性大幅度提高，可耐受高达50℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升，可扩增长达10 kb的cDNA。
该试剂盒包含gDNA digester，可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。该试剂盒提供两种cDNA合成引物：Random Primers N6 和oligo (dT)18，用户可根据需要，选择Random Primers N6，Oligo (dT)18或Gene Specific Primers作为逆转录引物，合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR或者qPCR反应。
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号（规格） 11121ES60 (100 T) |
11121-A | RNase-free ddH2O | 1 mL×2 |
11121-B | 5×gDNA digester Buffer | 200 μL |
11121-C | gDNA digester | 100 μL |
11121-D | 5×Hifair® Ⅱ Buffer plus | 400 μL |
11121-E | Hifair® Ⅱ Enzyme Mix | 200 μL |
11121-F | Oligo (dT)18 (50 μM) | 100 μL |
11121-G | Random Primers N6 (50 μM) | 100 μL |
【注】：1）5×Hifair® Ⅱ Buffer plus包含gDNA digester抑制剂和dNTP；2）Hifair® Ⅱ Enzyme Mix包含RNase inhibitor。
运输与保存
冰袋运输。-20℃保存，有效期18个月。
注意事项
1）反应液的配制应在冰上操作完成，操作过程应避免RNase污染。
2）建议RNA是溶于水而不是TE中，因为TE会干扰gDNA去除以及逆转录反应。
3）可以不经过基因组去除步骤，直接进行逆转录，这样所得到的结果与使用Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit（Cat No. 11119ES）效果一致。但是请勿将gDNA digester与11119ES中的5×Hifair® Ⅱ Buffer配套使用，因其不含终止gDNA 去除反应的成分，会影响反转录和后续的qPCR实验。
4）本产品仅作科研用途！
关于逆转录引物的选择
1） 如果模板为真核生物来源，建议选择Oligo (dT)18 ，与真核生物mRNA的3’ Poly A尾配对，可获得最高产量的全长cDNA。
2）原核生物RNA的反转录请选用Random Primers N6或者基因特异性引物。
3）Random Primers N6适用性较广，适用于mRNA、rRNA、tRNA、small RNA和LncRNA等模板。
4）使用Random primers N6，进行2 kb以下的cDNA合成时，Random primers N6的使用量为 1-2 μL；2 kb 以上的cDNA合成时，Random primers N6 的使用量为0.4-1 μL。
第一链cDNA合成操作步骤
一、若实验需要去除残留基因组DNA
1. 在RNase-free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。
组分 | 使用量 |
RNase-free ddH2O | To 10 μL |
5× gDNA digester Buffer | 2 μL |
gDNA digester | 1 μL |
Total RNA | 1 ng -5 μg* |
or mRNA | 1 ng-500 ng* |
【注】：* 若后续实验为qPCR，Total RNA投入量为1 ng -1 μg；mRNA的投入量为1 ng-100 ng。若基因的表达丰度很低，最多可投入5 ug Total RNA或500 ng mRNA。
2. 逆转录反应体系配制（20 μL体系）
组分 | 使用量 |
RNase-free ddH2O | To 20 μL |
上一步的反应液 | 10 μL |
5× Hifair® Ⅱ Buffer plus | 2 μL* |
Hifair® Ⅱ Enzyme Mix | 2 μL |
Random Primers N6 (50 μM) | 1 μL |
or Oligo (dT)18 (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) | or 1 μL |
or 1 μL |
【注】：1）逆转录引物：荧光定量实验推荐Random Primers N6与Oligo (dT)18 1:1混合使用。
2）5×Hifair® Ⅱ Buffer plus加入量（*）：因gDNA digester buffer的影响，本体系中只需要加2 μL。
3）建议先加入5×Hifair® Ⅱ Buffer plus混匀后再添加反转录引物，以保证*抑制gDNA digester的活性。
3. 逆转录程序设置
温度 | 时间 |
25℃ | 5 min |
42℃ | 30 min |
85℃ | 5 min |
【注】：逆转录温度：推荐使用42℃。对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到50℃。
4. 逆转录产物可以-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。
二、若实验无需去除基因组DNA
1. 逆转录反应体系配制（20 μL体系）
组分 | 使用量 |
RNase-free ddH2O | To 20 μL |
Total RNA | 1 ng -5 μg |
or mRNA | 1 ng-500 ng |
5× Hifair® Ⅱ Buffer plus | 4 μL* |
Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers N6 (50 μM) | 1 μL |
Hifair® Ⅱ Enzyme Mix | 2 μL |
【注】：1）逆转录引物：荧光定量实验推荐Random Primers N6与Oligo (dT)18 1:1混合使用。
2）5×Hifair® Ⅱ Buffer plus加入量（*）：因无gDNA digester buffer的影响，本体系中需要添加4 μL。
【可选步骤】：针对复杂模板，建议RNA、H2O、反转录引物在65℃保温5 min 后，冰上迅速冷却。然后再加入反转录酶和Buffer。
2. 逆转录程序设置参照上述基因组去除后的逆转录程序。
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HB210824
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