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细胞名称 HuCCT1人胆管上皮癌细胞 |HuCCT1细胞
生长特性 贴壁生长
形态特性 上皮样
产品规格 1×10^6 cells/瓶
培养条件 MEM+10%FBS+1%P/S
生长条件 气相：5%CO2 95% 空气 温度：37 ℃
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
背景资料 初认为这个细胞源自喉上皮癌，但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现，起源细胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
HuCCT1人胆管上皮癌细胞 |HuCCT1细胞常规说明：
冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次
特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。
一、 细胞复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、HuCCT1人胆管上皮癌细胞
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
三、HuCCT1人胆管上皮癌细胞 冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制： 70%的*培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
要注意的就是无菌操作！
HuCCT1人胆管上皮癌细胞在能量储存和代谢过程中有着重要的作用。
脂肪细胞分化是一个发展的过程，它对代谢稳态和营养信号很重要。
它由复杂的过程控制，如基因表达和信号转导。
前脂肪细胞存在于成人脂肪组织中，能根据能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪细胞。
前体细胞的增殖和分化能够增加脂肪组织的体积。
在体外培养中，不同的组织来源前脂肪细胞的油脂含量，成脂转录因子表达和TNFalpha诱导的凋亡均有不同。
同时研究表明它还与脂肪分化以及许多生理病理过程密切相关，如脂肪代谢、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。
HuCCT1人胆管上皮癌细胞<7210>人脂肪细胞-内脏提取于内脏脂肪组织，<7200>人脂肪细胞-皮下提取于人皮下脂肪组织，*代冻存，每管含有细胞数>1×106 cells/ml，此细胞通过CD44, CD90免疫荧光染色和脂肪染色验证，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
推荐培养基:（PAM, Cat. No. 7211）
其他产品信息：
NDB0385-100ml Nonidet® P-40 （NP-40） 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 100ml
NDB0385-500ml Nonidet® P-40 （NP-40） 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 500ml
NE109-100ml Nonidet® P-40 （NP-40） 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 100ml
NE109-500ml Nonidet® P-40 （NP-40） 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 500ml
N6250-100g Norfloxacin 诺氟沙星 [70458-96-7] 100g
N2858-25g DL-Norvaline DL-正缬氨酸 [760-78-1] 25g
细胞培养常见问题及解决方法
问题 | 原因 | 解决方案 |
细胞生长缓慢 | 生长培养基使用不当 | 按照生产商的建议，使用相应的预热生长培养基。 |
生长培养基中血清质量差 | 使用其他批次血清。 | |
传代操作不当 | 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。 | |
换液过于频繁 | 降低换液频率，参考生产商推荐的换液频率。 | |
细胞传代次数过多 | 使用传代次数较少的健康细胞。 | |
细胞生长超过汇合状态 | 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行，建议细胞密度达 80-90%传代。 | |
细胞被支原体污染 | 将细胞、培养基和试剂丢弃；新取一只冻存细胞，并且使用新的培养基和试剂。 | |
细胞复苏存活率低 | 细胞冻存不当 | 新取一只冻存细胞，并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中，直至复苏。 |
自行制备的冻存细胞无活性 | 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。 | |
制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。 | ||
严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。 | ||
新取一只冻存细胞。 | ||
细胞复苏方法不当 | 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。 | |
确保冷冻细胞解冻迅速，接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。 | ||
复苏培养基使用不当 | 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。 | |
细胞稀释过度 | 按照生产商的建议，将解冻后的细胞高密度接种，以改善复苏效果。 | |
处理细胞时动作不够轻柔 | 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外)，也不要高速离心细胞。 | |
冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 | 如果未避光储存，冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质；新取一只冻存保护剂，重新冻存细胞。 |
★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
★注：如运输过程中导致细胞污染或者死亡，我们将无条件补发
收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
后，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么较可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。
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